Tincion simple

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MICROBIOLOGIA APLICADA Manual de Laboratorio

PRACTICA Núm. 3 PREPARACIONES DE EXTENSIONES O FROTIS Y TINCION SIMPLE

I. OBJETIVO Conocer el procedimiento para preparar extensiones ó frotis y losdiferentes métodos de tinción, así como su utilidad en el estudio microscópico de los microorganismos.

II. INTRODUCCION Un procedimiento útil para el examen de muestras es el estudio microscópicode preparaciones fijas - extensiones o frotis - preparados a partir de ellas y coloreadas por el método adecuado. Esto permite eliminar el movimiento que presentan los microorganismos en laspreparaciones en fresco. La retención de colorantes de alquitrán de hulla por las bacterias permite su fácil observación bajo el microscopio. La forma más común de preparar un frotis es extender un poco demuestra sobre un portaobjetos desengrasado, con el asa bacteriológica, pero también se puede hacer con un hisopo ó presionando el portaobjetos sobre la muestra “impronta”. Dependiendo del tipo demicroorganismo o estructura del mismo que se desee observar es el tipo de tinción que se emplea. P. ej. Tinción Simple, Diferencial de Gram, Negativa, para cápsulas (Método de Anthony), para flagelos, paraendosporas, para núcleo, para bacterias ácido alcohol resistentes (Tinción de Ziehl Neelsen), entre otras. Los colorantes son productos químicos sintéticos del tipo de la anilina capaces de combinarsecon una gran variedad de sustancias impartiéndoles color. El color es impartido por su estructura química. Los colorantes de alquitrán de hulla usan bases de anillos aromáticos tales como benceno,naftaleno o antraceno. Varios grupos químicos son ligados a los anillos aromáticos para impartir los diferentes colores. Los grupos productores del color son llamados cromóforos, siendo los más comunesp-quinona y diazo. Ciertos grupos químicos llamados auxocromos, tales como los grupos amino e hidroxilo ayudan a fortalecer a los cromóforos.

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