tinciones citoquimicas

Tinciones CitoquímicasNEGRO SUDÁN
Es una coloración no enzimática útil en patología mieloide. Tiñe los fosfolípidos y otros lípidos, colorea los gránulos azurófilos y específicos de los granulocitos y tiene la ventaja de que con el tiempo no disminuye la actividad. Los neutrófilos segmentados y sus precursores muestran unos gránulos gruesos en el citoplasma de color gris muy oscuro.
El NegroSudan es un colorante lipofílico, capaz de penetrar moléculas de lipoproteínas presentes en las células sanguíneas. Hay una estrecha relación entre la MPO y la reacción del NS, ambas son positivas en las mismas células.
Útil para diferencial: LLA (-) y LMA (+)
MIELOPEROXIDASA
La demostración citoquímica de esta enzima se basa en la acción oxidante de la peroxidasa sobre el substrato,bencidina, en presencia de peróxido de hidrógeno, apareciendo un precipitado amarillo ocre en el lugar del citoplasma en donde se ha producido la reacción.
La mieloperoxidasa se sintetiza en el retículo endoplasmático rugoso, de donde pasa a las cisternas del aparato de Golgi quedando localizada fundamentalmente en la granulación primaria o azurófila con lo que da una coloración de tono marrón (ocre).Se localiza sobre todo, en los gránulos primarios de los neutrófilos y precursores, así como en los gránulos de los eosinófilos y monocitos.
Dicha enzima se combina in vivo con peróxido de hidrógeno transformándose en un potente agente bactericida, viricida y fungicida.
La aplicación fundamental de la mieloperoxidasa se refiere a la capacidad discriminatoria entre celularidad blástica mieloidey linfoide, ya que los mieloblastos muy precoces sin estigmas de diferenciación mieloide ya pueden ser mieloperoxidasa positivos.
Un déficit de mieloperoxidasa en los PMN maduros, excepto en el caso de que se trate de una deficiencia congénita, debe interpretarse como un signo disgranulopoyético.
PAS
La reacción de PAS o del ácido peryódico de Schiff se basa en la rotura de los enlaces -C-C-presentes en los carbohidratos por la acción del ácido peryódico, potente agente oxidante, liberándose grupos aldehído que al combinarse con el reactivo de Schiff (incoloro) originan un compuesto de color rojo- púrpura (magenta) tiñendo los componentes celulares que contienen los compuestos oxidados. Una variedad de compuestos intracelulares reacciona con el PAS; pero el glucógeno es elcomponente principalmente reaccionante.
La intensidad de la tinción depende del número de grupos aldehídos liberados por el ácido peryódico.
La reacción del PAS ha perdido utilidad en el diagnóstico hematológico después de la aparición de mejores marcadores. Sigue teniendo interés en la diferenciación de diferentes tipos de leucemias linfoblásticas, en la eritroleucemia y en diversas mielodisplasias.FOSFATASA ÁCIDA
Es una enzima hidrolítica perteneciente al grupo de las fosfomonoesterasas, que actúa sobre los ésteres del ácido fosfórico; su pH óptimo de actuación oscila entre 4,7 y 5,5. Se trata de una enzima de ubicación lisosómica.
La demostración citoquímica se basa en la hidrólisis del substrato naftol-AS-Bi-fosfato, liberándose unos productos intermedios que al combinarse con unasal diazoica dan un precipitado de color rojo anaranjado en el citoplasma.
La aplicación práctica del estudio de la FA se refiere sobre todo a los SLPC y LAL, dónde existe una buena correlación entre el tipo de positividad y el fenotipo de membrana. El 90% de las LAL de origen T dan una reacción + intensa de localización centrosómica; y las de tipo B o no-T-no-B suelen ser -. La LLC-T y otros SLPCT suelen cursar con valores elevados de FA que es tartrato sensible. La LLC-B presenta muy escasa actividad al igual que ocurre con otras proliferaciones de linfocitos B.
La aplicación práctica del estudio de la FA se refiere sobre todo al estudio de los síndromes linfoproliferativos crónicos (LPC) y leucemia aguda linfoblástica (LAL), dónde existe una buena correlación entre el tipo de...