Tipificacion De Hla

INMUNOLOGÍA
RESUMEN PRESENTADO POR: RAMOS ALMIRÓN, VÍCTOR ANTONIO
GRUPO: 7
EL ABC DE LA TIPIFICACIÓN DE HLA
Es una prueba que evalúa unas proteínas llamadas antígenos leucocitarios humanos (HLA, por sus siglas en inglés, Human leukocyte antigen), los cuales se encuentran en la superficie de casi toda célula en el cuerpo humano. Estos antígenos se encuentran en grandes cantidades en lasuperficie de los glóbulos blancos y le ayudan al sistema inmunitario a establecer la diferencia entre los tejidos corporales y las sustancias extrañas.
La función del HLA es de diferenciar lo propio de lo ajeno y asegurar la respuesta inmune, capaz de defender al organismo de algunos agentes extraños que generan infecciones. La base genética de estas proteínas está compuesta por 4 millones de pbubicadas en el brazo corto del cromosoma número 6, el cual consta de 400 genes y presenta un alto grado de polimorfismo.
El HLA se subdivide en 3 clases:
Clase I | Clase II | Clase III |
HLA de tipo A,B y C | HLA de tipo DR, DQ y DP | Complemento C2, C4 y TNF |

* De la clase I, el HLA A y B son los más importantes para hacer tipificación de órganos.
* De la clase II, el HLA DR es el másimportante para hacer tipificación de órganos.

TIPIFICACION DEL HLA
Se requiere tipificación HLA exacta para realizar el trasplante de órgano sólido, medula ósea y sangre de cordón umbilical. El uso de los métodos moleculares para la tipificación de los alelos HLA clases I y II tienen un papel importante dentro de las técnicas utilizadas en un laboratorio de histocompatibilidad, por ofreceralgunas ventajas en comparación con los métodos serológicos tradicionales: flexibilidad en la resolución, reproducibilidad y mayor precisión.
La tipificación HLA es un estudio mediante el cual se determina cuáles de todas las variantes del locus de HLA están presentes en individuo determinado, tipificación quiere decir que debemos de estudiar a un cierto individuo sea donante o receptor todos lostipos de variantes que tenga el locus de HLA. Encontrar cada una de estas variantes que son importantes en la compatibilidad del órgano.
Muestras
Se utiliza una suspensión de linfocitos obtenidos a partir de sangre periférica con el método de gradiente de densidad, utilizando FycollHypaque.
* En donantes cadavéricos la mejor muestra se extrae de un trozo del bazo.
* En donantes vivos sehace en sangre total, el tubo de tapa roja de muestra se recomienda cuando nosotros vamos hacer tipificación serológica de HLA.
* El tubo tapa morada se recomienda para tipificación de HLA por métodos de biología molecular.

MÉTODOS DE TIPIFICACIÓN
MÉTODOS SEROLÓGICOS | MÉTODOS MOLECULARES |
QUICK SCREEN (Ig G, HLA Clase I: HLA-A,B y C) | PCR SSP (Primers de Secuencia Especifica) |MICROAMS (Ig G, HLA Clase I y II) | PCR SSOP Reversa (Sondas de Oligonucleótidos Específicos). |
BSCREEN (Ig G, HLA Clase II) | SBT (Tipificación Basada en la Secuencia). |

* Los métodos serológicos son de baja resolución y todos dosan Ig G, el PCR SSP y PCR SSOP Reversa son de intermedia resolución y el SBT es de alta resolución.
a) Tipificación Serológica
Principio: Poner en contactolinfocitos aislados del sujeto a estudiar con un panel de aloanticuerpos o anticuerpos monoclonales anti-HLA capaces de reconocer determinadas especificidades antigénicas.
Ventajas | Desventajas |
Técnica parecida a la ELISA INDIRECTA.Técnica fácil de realizar.Se realiza en 3 horasSe utilizan Anticuerpos monoclonales, se obtienen resultados aceptables de bajo nivel de resolución. | Se requierenmayores volúmenes de sangre (Separación de Linfocitos T y B).Se requieren linfocitos viablesEs difícil encontrar antisueros específicos para especies raras. |

b) PCR-SSP (Primers de Secuenciación Especifica)
* Se trabaja con pares de Primers de secuencias específicas, cuyas secuencias discriminan las diferentes variantes que puede presentar el locus.
* Cada reacción de PCR se...