Tipos De Microscopio

Microscopía y técnicas de
estudio a nivel celular

Microscopía

Campo claro
Campo Oscuro

Ópticos

Contraste de fase
Confocal

Tipos de
microscopios

Fluorescencia

Electrónicos Transmisión
Barrido

Algunos Conceptos…

Magnificación

Aumento que logra el
equipo

Resolución (D)

Distancia mínima a la cual
el equipo puede mostrar
dos puntos como
entidades separadas

Algunos Conceptos…¿De qué depende la resolución?

D=

0,5 . λ

n . senθ
¿Cómo
disminuir D?

Algunos Conceptos…

¿De qué depende la resolución?
D=

0,5 .

λ

n . senθ

Longitud de onda
del haz de luz

FILTRO
AZUL

Algunos Conceptos…

¿De qué depende la resolución?
D=

0,5 . λ

n.

senθ
Objetivo



LENTE CON
AN MAYOR
muestra

Algunos Conceptos…

¿De qué depende la resolución?
D=

0,5 . λ

n . senθ

Índice derefracción

ACEITE DE
INMERSIÓN

Es el cambio de dirección que experimenta un rayo de
luz cuando pasa de un medio transparente a otro también
transparente. Este cambio de dirección está originado
por la distinta velocidad de la luz en cada medio.
nAire: 1 nAceite:1,5

Microscopio óptico

TORNILLOS DE

REVOLVER
EL PORTAOBJETOS

Microscopio óptico

Microscopio óptico - Campo claro

EosinofiliaMicroscopio óptico - Campo oscuro

Objetos brillantes
sobre un fondo
oscuro

Observar organismos
vivos sin necesidad
de tinción

Microscopio óptico - Campo oscuro

Treponema pallidum

Microscopio óptico - Contraste de fase

Aumenta pequeñas diferencias en el índice de
refracción y densidad en la célula
Observar organismos
vivos sin necesidad
de tinción
El anillo forma un cono hueco de luz.
El rayo deluz que atraviese la muestra va a retrasarse
respecto del rayo que siga de largo
luz

sombra

Microscopio óptico - Contraste de fase

Microscopio óptico - Contraste de fase

Células HeLa (Henrietta Lacks)

Eritrocitos Humanos

Zygnema Filamentous Algae

Microscopio óptico - Interferencia

Mismo principio que el microscopio
de contraste de fase pero utiliza luz
polarizada

Permite lavisualización detallada sin
teñir
Maximiza la diferencia entre los
índices de refracción entre las partes
de la muestra de forma de hacer
visibles los limites celulares

Microscopio óptico - Contraste de fase e interferencia

Contraste
de fase

Interferencia
diferencial

Microscopio óptico - Fluorescencia

Los objetos pueden también visualizarse
por la luz que ellos mismos emiten
Pasa sólo la λ que
permitela excitación
del fluorocromo

Restringe
infrarrojo

Microscopio óptico - Fluorescencia

Algunos “objetos” fluorescentes…

GFP
(Green fluorescent protein)

Aequoria victoria

Drpspphila

hela

Célula de cebolla (peroxisomas)

Microscopio óptico - Fluorescencia - Confocal

Microscopio óptico - Fluorescencia - Confocal

Microscopio óptico - Fluorescencia - Confocal

Microscopía electrónica -Microscopio electrónico de transmisión (TEM)

Microscopía electrónica - Microscopio electrónico de transmisión (TEM)

Bacilos en división

Mitocondria 60.000x

Bacteria fagocitada por un
macrófago
Herpes virus ensamblándose en el núcleo

Microscopía electrónica - Microscopio electrónico de barrido (SEM)

Microscopía electrónica - Microscopio electrónico de barrido (SEM)

Glomérulo renal 1200xCélula en corte transversal

Espermatozoides bovinos

Piel humana

Microscopía electrónica - Microscopio electrónico de barrido (SEM)

Bacterias sobre un estoma

Glób. Blanco

Célula vegetal con cristales (falsa tinción)

Glób. Rojo

Microscopía electrónica - Ventajas y desventajas

 Elevados costos de los equipos  y una
infraestructura adecuada no permiten el uso
de la técnica en cualquierlaboratorio.
 Altos costos de procesamiento de las muestras
 La manipulación de reactivos se  torna
peligroso por la elevada condición toxica de
los mismos.
 Procesamiento tedioso de la muestra. Creación
de artefactos
 La complejidad de los equipos requiere de
personal técnico especializado.

 Proporciona resultados de amplia resolución y

Técnicas inmunológicas

Técnicas inmunológicas...