TP DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

































Métodos de observación:

1) ¿Cuál es la unidad para medir las células? ¿Cómo se abrevia esta unidad? Escribe equivalencias con unidades conocidas.

2) Realiza un cuadro comparativo entre los tipos de microscopios (óptico-electrónico-fluorescente) establece criterios de comparación, por ejemplo: fuente de iluminación, resolución,amplificación, tipo de tinción empleada, técnica de preparación de la muestra, etc.

3) Resuelve…

4) A) analizando la siguiente imagen y empleando la bibliografía obligatoria de la cátedra, explica brevemente paso a paso, el protocolo de fraccionamiento celular.


b) ¿cuáles son los inconvenientes que pueden surgir en el desarrollo de dicha técnica?

Respuestas:

1) La unidad paramedir a las células se llama micrómetros (también llamados micras) la cual equivale a la milésima parte de un milímetro. Se la representa con las letras m (micrómetros) o (micra)


2) Microscopio óptico: está conformado por un sistema de lentes llamado objetivo, el cual es de enfoque bastante corto. Proporciona una imagen amplificada del objeto. También posee un sistema llamado ocular queproporciona una imagen virtual de la primera. Su potencia se define como el producto de la amplificación del objeto por la potencia del ocular. El observador no tiene una visión nítida en el eje óptico sino, solo sobre determinado espesor del objeto. La profundidad del campo es muy débil y se suelen realizar cortes sucesivos.

Microscopio electrónico: el haz de fotones se remplaza por un haz deelectrones. La longitud de la onda es más corta. El límite de resolución es superior al del microscopio de luz. El nivel de separación que se obtiene es cercano a 0,2nm y 1000 veces más alto. Las imágenes que se obtienen se pueden amplificar hasta 500.000 veces. No se observa colores. Los objetos que se observen deben ser finos. Las muestras experimentan una degradación rápida baja la acción de loselectrones que lo atraviesan. Además de cortes permite observar replicas obtenidas mediante la técnica de criofractura, preparaciones de moléculas sombreadas del mismo modo o bien preparadas con tinción negativa.
Microscopio fluorescente: permite analizar la luz que se remite por fluorescencia de una muestra que se ilumina con luz de longitud de onda adecuada. Las moléculas fluorescentes emitenluz de la longitud de onda más alta. Todo compuesto fluorescente se caracteriza por una longitud de onda precisa de excitación mínima y una longitud de onda de remisión máxima. Está equipado con una fuente luminosa que abarca hasta el ultravioleta. La luz que llega al ojo del observador no atraviesa la muestra observada.

3)





Fraccionamiento químico

Centrifugación

CromatografíaElectroforesis

Ultracentrifuga-
cion

Inmunocitoqui-
mica


Objetivo del
Método de
análisis


Separar molé-
culas de
macromlecu-
las
Acelerar la sedimenta-
cion
Separar con facilidad
Azucares sim-
ples, amino-
ácidos
ácidos
Orgánicos,
ácidos
grasos y nucelotidos.
Separar biomoléculas
en
disolución
cuando se ven sometidas a un campo
Eléctrico.Separar macromoléculas
y supramacro-
moleculas
Ubicar macromolécu-
las a escala estructural o ultraestructu-
ral.


En que se
basa


En la
desnaturaliza-
cion de las macromolé-
culas
. Separar soli-
dos de liqui-
dos de dife-
rentes densi-
dades me-
diante una
fuerza centri-
fuga.
Se basa
en el princi-
pio de
retención
selectiva
En la migra-
ción de iones
en uncampo
Eléctrico.
Técnica que se utiliza para
separar los componentes
de una solu-
Ción según su peso.
Demostrar antígenos presentes
en células o
tejidos
Utilizando anticuerpos específicos.




Mecanismo
de
ejecución



Homogenei-
zación de la proteínas a
separar para producir la
rotura de la membrana
Celular. Luego sigue el Sock osmótico
donde las
células...