Trabajo 1

Práctica No. 7
Determinación de colesterol y triacilgliceroles (triglicéridos)

Objetivo. El alumno integrará aspectos bioquímicos concernientes al tema de lípidos. Conocerá métodos paradeterminar el colesterol y los triacilgliceroles (triglicéridos) estableciendo su relevancia metabólica, así como su importancia clínica.
Fundamento. El colesterol presente en la muestra origina uncompuesto coloreado según la reacción siguiente.
CHE
Esteres de colesterol + H2O ---------- colesterol + ácidos grasosCHOD
Colesterol + O2 ---------------- 4-colestenona + H2O2
POD
2H2O2 + fenol + 4-Aminofenazona ---------------- Quinonimina + 4H20
Laintensidad del color formado es proporcional a la concentración de colesterol presente en la muestra.


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Procedimiento:

Cálculos:Absorbancia de la muestra
Colesterol total (mg/dl) = --------------------------------- X 200 = mg/dlAbsorbancia del patrón

REFERENCIAS:
Menos de 200 mg/dl Normal.
200 – 239 mg/dl Moderado
240 o más. Alto.Triacilgliceroles (triglicéridos)
Fundamento.
Los triglicéridos incubados con lipoproteilipasa liberan glicerol y ácidos graso libres. El glicerol es fosforilado por glicerolfosfato deshidrogenada(GPO) y ATP en presencia de glicerol quinasa para producir G3P y ADP da. El G3P es entonces convertido a dihidroxiacetona fosfato (ADP) y peroxido de hidrogeno por GPO.
Al final el peroxido dehidroxeno reacciona con 4-( aminofenazona ) y p-clorofenol, reacción catalizada por la peroxidasa (POD) dando una coloración roja.

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BLANCO
ESTANDOR
MUESTRA
REACTIVO
1ml
1ml...