Trabajo práctico yogur y bacteriocinas

TRABAJO PRÁCTICO N° 6
Aislamiento de cepas de Lactobacillus sp. y Streptococcus thermophilus de yogur

Objetivos:
Aislamiento de Lactobacillus sp. y Streptococcus thermophilus de yogurescomerciales. Conocimiento de los requerimientos nutricionales y las condiciones ambientales propicias para su desarrollo.

Introducción
Los yogures comerciales son una mezcla simbiótica de dos cepas:Streptococcus thermophilus (ST) y Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus (LB). Si bien ambos microorganismos pueden crecer en forma independiente, la velocidad de producción de ácido es mayor cuandose emplean conjuntamente que cuando se los utiliza en forma individual.
El ST crece mas rápidamente y produce ácido, el cual estimula el crecimiento del LB; por otra parte, la actividad proteolíticadel LB origina péptidos y aminoácidos que son utilizados por las cepas de ST. Estos microorganismos son finalmente los responsables de la formación del sabor y textura típicos del yogur.
La mezclacoagula debido a la disminución del pH que alcanza el punto isoléctrico de las caseínas. Los estreptococos son responsables por la caída inicial del pH hasta un valor aproximado de 5.0, mientras quelos lactobacilos son responsables de la subsiguiente caída a un pH = 4.5.
El LB se aísla en medio MRS acidificado condición que favorece su desarrollo e inhibe el crecimiento de ST. El ST crece enmedio M 17 tanto en líquido como sólido, mientras que el LB es inhibido por completo.

Material Biológico
Yogur comercial.

Medios de cultivos
Agar MRS (Man - Rogosa - Sharpe)
Preparar el mediosegún las indicaciones, disolver en agua destilada y llevar a pH 5.4 con ácido acético. Agregar el agar a una concentración de 1,5%. Esterilizar.

Caldo M17
Preparar el medio según las indicaciones,fraccionar en tubos de ensayo y esterilizar.

A) Aislamiento de lactobacilos
Inocular la muestra en el agar MRS e incubar 48 hs a 37 °C en microaerobiosis.
B) Aislamiento de estreptococos...