Trabajo

Informe de Laboratorio
N° 7
“Cromatografía en columna”.

Objetivos

1. Conocer y aprender el método de cromatografía en columna, con sus pasos y sucesos, para luego aplicar los conocimentos de ella.

2. Purificar el ácido benzoico mediante esta técnica.

3. Encontrar el eluyente adecuado para el ácido bezóico.





















Aparatos yreactivos


Materiales
 Columna de cromatografía (40 ml)
 Soporte universal.
 Varilla de vidrio y espátula.
 Embudo.
 Pipetas pasteur.
 Tubos de ensayo.
 Algodón.
Reactivos

 Azul de metileno.
 Ácido benzóico.
 Acetona.
 Metanol.
 Gel de sílice (sílica)























Introducción
La cromatografía en columna es un método utilizadopara la separación y la purificación de diferentes compuestos orgánicos que se encuentren en estado sólido o líquido. En este tipo de cromatografía, la fase estacionaria utilizada, es decir, el absorbente, se coloca en el interior de una columna de vidrio, la cual finaliza con una llave para controlar el paso de sustancias al exterior de la columna. La fase estacionaria se impregna con el eluyenteo fase móvil. Luego la mezcla orgánica que nos interesa separar la depositamos por la parte superior de la fase estacionaria, y así la fase móvil podrá ir atravesando el sistema. Los compuestos que se encuentran disueltos en la fase móvil, poco a poco saldrán de la columna cromatográfica, y se recogen en fracciones. Las fracciones menos polares, que son por lo general las que se retienen poco onada en el absorbente, serán las primeras en salir de la columna. En cambio, las sustancias más polares, quedan retenidas por más tiempo en el absorbente, y a menudo es necesario el uso de diferentes disolventes con la finalidad de incrementar su polaridad para que sean arrastradas por estos. El tiempo que se necesita para hacer fluir un compuesto por la columna, se conoce con el nombre de tiempo deretención. Este tiempo varía, siendo característico de cada compuesto en una condiciones cromatográficas determinadas, que varían según el absorbente usado, el disolvente, la presión, el diámetro que tenga la columna utilizada, etc. El absorbente mayormente utilizado para las cromatografías en columna, es el gel de sílice, a veces también se utilizan la alúmina o el florisil (silicatomagnésico). La cromatografía en columna puede realizarse por gravedad o a media presión. Cuando se realiza a media presión, se conecta la cabeza de la columna a un compresor o a una línea de aire comprimido. La medida de las partículas de gel de sílice para realizar las cromatografías a media presión debe ser más pequeñas que en el caso de la cromatografía por gravedad. Si en la cromatografía por gravedadutilizásemos un gel de sílice con un tamaño de partículas más pequeñas, no se produciría elución, pues se impediría el flujo del disolvente. Pero en cambio, si aplicamos presión, entonces debido a la fuerza si se produciría la elución por el disolvente. A causa de la disminución del tamaño de las partículas del absorbente, se produce una separación más eficaz. Generalmente la cromatografía a mediapresión, produce mejores resultados que la cromatografía por gravedad, y además, al ser más rápida, es la más utilizada. Cuando vamos a realizar una cromatografía en columna, lo primero que debemos hacer es elegir un disolvente adaptado para nuestro caso, para así optimizar la separación de los componentes de la mezcla. Esta operación se produce a través de cromatografía analítica en capa fina. Lavariante más influyente en la eficacia de la separación de la cromatografía a media presión usando gel de sílice es el diámetro de la columna, así como la cantidad de gel utilizado. Para elegir el disolvente, primero se lleva a cabo una cromatografía en capa fina de la muestra a analizar. En el caso de columnas pequeñas, lo ideal es usar un eluyente menos polar que el conseguido en el resultado...