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EXTRACCIÓN Y PURIFICACIÓN DEL DNA DEL GERMEN DE TRIGO

1. OBJETIVOS:
Analizar el fundamento de la obtención y purificación del ácido desoxirribonucleico (ADN) del germen de trigo.

PurificarADN a partir del germen de trigo

Evaluar el grado de pureza del ADN obtenido
2. RESULTADOS






Comparación de absorbancia de ADN sin hidrolizar y ADN hidrolizado




ADN
260/2801.20
260/230
0.63
230
0.757
260
0.478
280
0.399
Efecto hipercromico
260/280
------
260/230
------
230
------
260
0.761
280
------



En el espectro con una absorbancia de 260 laconcentración del ADN del germen de trigo fue de 0.478, después de haber sufrido el dúplex la desnaturalización se puede observar un aumento en la absorbancia debido a que se vuelve una cadenasencilla.
Analisis de resultados
Al extraer el ADN de germen de trigo primero rompimos la pared celular mediante un choque térmico usando el hielo seco, agregamos TSM para solubilizar la membrana, sefiltró para separarlo de otros componentes que puedan interferir en la extracción y determinación, se centrifuga para obtener las proteínas junto con el ADN, se agrega TRIS y EDTA para mantener el pHoptimo del ADN, también para secuestrar los iones que no son deseados en esta determinación, se continúan añadiendo soluciones para evitar la degradación del ADN, aprovechando sus propiedades paracontinuar su extracción, a continuación se vierte en Etanol frio porque el ADN no es soluble en alcohol, se recolecta el ADN después de unos días en el refrigerador porque se formó en una especie de nata locual es sencillo se vuelve a centrifugar para obtener el mayor porcentaje de ADN posible se añade mezcla Sevag para separar fases y eliminar impurezas, se agita durante unos 25m, se vuelve acentrifugar, ahora se obtienen 3 fases la inferior con Mezlca Sevag l de en medio con proteínas y la superior con ADN se recupera con una pipeta Pasteur para proceder a realizar las 3 pruebas
Se tomó...