Traduccion de nitrato reductasa

Nitrate Reductase Complex of Escherichia coli K-12:
Participation of Specific Formate Dehydrogenase
and Cytochrome b, Components in
Nitrate Reduction
JOSE RUIZ-HERRERA' AND J. A. DEMOSS
Department ofBiology, University of California, San Diego, La Jolla, California 92037
Received for publication 9 June 1969
La participación de formiato deshidrogenasas diferentes y componentes del citocromoen la reducción de nitrato por Escherichia coli se ha estudiado. La actividad formato deshidrogenasa presentes en los extractos preparados a partir de nitrato inducida por las células de la cepa HfrH se activa con receptores de electrones diferentes, incluyendo el azul de metileno, metosulfato fenazina, y bencilo viologeno. Algunos mutantes que son incapaces de reducir el nitrato se nivelesbajos o no detectables de actividad formato deshidrogenasa ensayó con metileno metosulfato azul o fenazina como aceptor de electrones. De los nueve tales mutantes, cinco gas que se produce cuando crecen anaeróbicamente sin nitrato y poseía una viologeno bencil- vinculados actividad formato deshidrogenasa, lo que sugiere que formiato deshidrogenasas diferentes participar en la nitrato reductasay los sistemas de hydrogenlyase fórmico. Los otros cuatro mutantes formado poco gas cuando se cultivan en condiciones anaerobias la ausencia de nitrato y carecían de la deshidrogenasa formiato de bencilo viologeno-vinculados, así como la metileno metosulfato actividad ligada al azul o fenazina. El citocromo b1 presente en las células inducida por nitrato se distinguió por sus propiedadesespectrales y su genética el control de la principales del citocromo b1 componentes de las células aeróbicas y de las células cultivadas anaeróbica en ausencia de nitratos. El nitrato de bk citocromo específico fue completamente y rápidamente se reducirá en un 1 mm de formiato, pero no se reducirá en un 1 mm de reducción dinucleótido de nicotinamida adenina, ascorbato reduce sólo una parte de lacitocromo b1 que se redujo en un formiato. Cuando el nitrato se añadió, el formiato reducido citocromo b1 se oxida con una cinética bifásica, pero el citocromo ascorbato reducido bk se oxida con una cinética monofásica. Los efectos inhibitorios de n-heptilo hidroxiquinoleína-N-óxido en la oxidación del citocromo b1 por nitrato de siempre evidencia de que el nitrato de citocromo-específica secompone de dos componentes que tienen diferentes potenciales redox, pero idénticas propiedades espectrales. Llegamos a la conclusión de estos estudios que el nitrato de reducción de la E. coli es mediada por el funcionamiento secuencial de un formato deshidrogenasa específica, dos citocromo b específicos, componentes y nitrato reductasa.

Una serie de observaciones indican que el nitratoreducción de la Escherichia coli se produce principalmente por una vía de participación de formato deshidrogenasa, citocromo bl, y nitrato reductasa. Entre losdiversos sustratos que se metabolizan por E. coli, el formato es el electrón más eficaz donantes para la reducción de nitratos en las células cultivadas anaerobia en presencia de nitrato (2, 23). En estas células, formato deshidrogenasa,citocromo b1 y nitrato reductasa son inducidas a niveles relativamente altos en comparación con los de las células cultivadas en ausencia de nitrato (2, 17, 23). Estos tres componentes están presentes en la membrana fracciones (6) y han sido parcialmente purificada como una unidad a partir de extractos celulares (8). Por último, los mutantes de E. coli que son incapaces de producir nitritos a partir delnitrato (NR7 mutantes) la falta o formiato deshidrogenasa o nitrato reductasa o combinaciones de estas actividades y el citocromo b y (1, 16, 17, 22). La propuesta de formato deshidrogenasa y citocromo bi son los componentes específicos de la sistema de reducción de nitratos plantea algunas preguntas importantes sobre la relación de este vía con otras vías de transporte de electrones en E....