Transformación Genética De Bacterias Por Choque Termico

CENTRO DE CIENCIAS BÁSICAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

LABORATORIO DE INGENIERIA GENETICA

TRANSFORMACIÓN GENÉTICA DE BACTERIAS POR CHOQUE TÉRMICO
REPORTE DE PRÁCTICA #2




MEDINA DE ANDAMARIA ELENA




AGUASCALIENTES, AGS. A 26 DE SEPTIEMBRE DE 2012
RESULTADOS
Fig. 1. Imagen de la transformación genética de una bacteria


Fig. 2. Imagen del proceso de transformacióngenética de nuestro plásmido.


Fig. 3. Mapa de la transformación genética del plásmido pGLO donde se muestran sitios de corte, el origen de replicación, la posición del gen que codifica para elregulador del operón de arabinosa (araC), el promotor del operón (PBAD), el sitio en donde se ha clonado el gen que codifica a la proteína verde-fluorescente (GFP) y el sitio que ocupa el gen que codifica ala β-lactamasa (Amp) lo que confiere resistencia al antibiótico ampicilina a las bacterias que portan a este plasmido.
Fig. 4. Foto de las bandas de marcadores moleculares y bandas de nuestroplásmido pGLO+

Concentración de plásmido: 2.5µL





DISCUSIONES
Durante el proceso de nuestro protocolo no tuvimos ningún problema, sin embargo, cuando fuimos a revisar nuestro cultivo de E.coli pudimos observar que no tuvimos proliferación, esto nos hace mención de que no fue exitosa nuestra transformación genética. En el cuadro de resultados coloqué dos imágenes ilustrativas delprocedimiento que realizamos y en la Figura 3 añadí la foto del gel del plásmido pGLO de la otra sesión, sin embargo no se observan los cambios que esperábamos.
Debemos de tomar en cuenta que el plásmidopGLO mide poco más de 5,400 pares de bases y puede ser cortado con enzimas de restricción como la HindIII, EcoRI, entre otras para generar fragmentos de diferentes tamaños.
Se esperaba como resultadoun crecimiento en nuestro cultivo con un medio de cultivo con ampicilina, ya que nuestro plásmido le confería resistencia a la misma, sin embargo no obtuvimos ningún tipo de crecimiento, por lo...