Trichoderma Andrea

PRODUCCION DE TRICHODERMA EN SUSTRATO DE ARROZ



Instructor:
Ángela Milena Fuerte Barón





Aprendiz:
Jeimy Andrea Velandia Talero



Centro De Desarrollo Agropecuario y Agroindustrial
CEDEAGRO
Duitama
2015



INTRODUCCIÓN


“Trihoderma” es hongo microscópico que se adapta a cualquier tipo de ambiente, suelo y cultivo, posee una calidad de proteínas muy amplia, y es capaz de destruir todos loshongos que atacan a la planta sin dañarla.

Es un producto biológico que funciona como hongo favorecedor de fermentación de microorganismos. Contiene metabolitos benéficos que estimulan el crecimiento de la planta
La formulación líquida del “Trichoderma” que presentamos puede sustituir a los actuales pesticidas. “Se puede aplicar mezclada con el agua en el riego de las plantas, no sólo en susiembra”.

Las ventajas de este control biológico de enfermedades de las platas son múltiples: Mejora la germinación de las semillas, actúa como protector contra los hongos que atacan las raíces de estas plantas, estimula la resistencia de la planta, incrementa su crecimiento y la consecuente producción, y respeta el ambiente con microorganismos benéficos.

Uno de los sustratos utilizados parareproducir a Trichoderma spp., es el grano entero de arroz, el cual tiene grandes propiedades nutritivas para este tipo de hongo. Con el propósito de preparar un bioinsumo que realice un control biológico ante un posible patógeno, en el cual este hongo tenga un buen desarrollo y una alta producción de esporas viables y lograr asociarlo con la composición nutrimental de los sustratos. Se utilizó undiseño de diluciones desde -1 hasta la -7, Se cuantificó el número y porcentaje de viabilidad de las esporas y se correlacionó con el análisis químico proximal.










METODOLOGÍA

Inicio

Biomasa propagada

Hacer recuento de conidios

Inoculación del sustrato

Esterilización del sustrato

Incubación 20°C-25°C

Se realiza el montaje de azul de lactofenol

Recuento de conidios

Viabilidad deconidios

Producción del trichoderma








Materiales y equipos
Cajas de Petri
Asas
Probetas
Erlenmeyer
Vasos precipitados
Mecheros
Tubos de vidrio estériles
Micro pipetas de 100 y 1000 ul
Cabina de flujo laminar
Incubadora
Pipetas de vidrio de 1ml, 5ml y 10 ml estériles
Puntas para pipetear de 200 y 1000 ul estériles
Solución salina y/o solución peptonada estériles
Vortex
Balanzas
Autoclave

1.Aislamiento del trichoderma
Se realizaron diluciones seriadas el cual se tomó 0,1ml de 10-1 hasta 10-7 que fueron sembradas en cajas Petri con medio de cultivo optimo y ya anteriormente establecido, las cajas fueron incubadas a 25°C durante 7 días y se realizó el recuento, se efectuó la identificación de trichoderma por medio de sus características microscópicas. Una vez identificada las cepas seaislaron en cajas de Petri.

2. preparación del inoculo
Se sacaron las cajas Petri con un crecimiento de Trichoderma masivo y fue extraído por medio de la aplicación de una solución, con la solución restante se realizaron disoluciones seriadas y con las ultimas disoluciones se llevó a cabo el recuento de conidios.




3. Prueba antagónica
Para la producción del trichoderma se inicio con unaprueba antagónica entre la bacteria fusarium y el antagonista el hongo Trichoderma, el cual se determinó la eficacia del hongo para luego empezar la producción de trichoderma.


Las pruebas de enfrentamiento se realizaron empleando la técnica de cultivo dual en platos Petri de 5 cm de radio, conteniendo 20 ml de Agar Sabouraud Dextrosa.
Se colocó en un extremo de la caja de Petri un disco de agar de4 mm de diámetro con micelio del patógeno (Fusarium) y en el extremo opuesto otro disco de 4 mm con micelio del antagonista (Trichoderma) a 5 cm aproximadamente entre ellos
se sembró en cajas separadas, un disco de agar (inóculo) con los hongos de cada antagonista y del patógeno, los cuales correspondieron a los controles;
posteriormente, los cultivos se incubaron a 25±1 ºC, 12 h continuas en...