Técnica Pcr Del Gen Metano Monooxigenasa Para Su Utilización Transgénica En La Bacteria Methanobrevibacter Ruminantium

Técnica PCR del gen Metano monooxigenasa para su utilización transgénica en la bacteria Methanobrevibacter ruminantium

ANDRÉS FELIPE VEGA GÓMEZ GELMAR BASTIDAS TORO ZOOTECNIA

ALBEIRO LÓPEZ SORANY MILENA BARRIENTOS BIOTECNOLOGÍA AGROPECUARIA

UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA MEDELLÍN 2011

1. JUSTIFICACIÓN

De acuerdo a la situación actual que se viene desarrollando en el mundo encuanto a los problemas de contaminación del medio ambiente producto de la contribución que hacen las explotaciones agrícolas e industriales en la formación y liberación de gases con efecto invernadero, es importante establecer nuevas propuestas que se apliquen en la disminución de la producción de los principales gases que tienen un aporte influyente a este problema global, ya que el principal gas deestas características que poluciona la atmósfera es el metano. En un estudio realizado en la ciudad de Los Angeles entre 1970 y 1972 indico que en la contaminación por hidrocarburos el metano representaba el 85% del total.1 Teniendo en cuenta que la practica ganadera es uno de los grandes aportantes a este problema (producción de metano como elemento secundario del proceso digestivo fermentativoen rumiantes), se ha tratado de buscar una solución incursionando en el área de la biotecnología y gracias a los aportes en el medio de la investigación que han contribuido al descubrimiento de nuevos especímenes de microorganismos con características especiales que pueden ser de ayuda en la salida de la problemática incursionada. Aunque el uso de organismos transgénicos tiene su controversia, sepodría decir que su utilización es una herramienta de gran apoyo para mitigar la contaminación. El desafío de los zootecnistas es la producción y/o desarrollo sostenible pecuaria y ella implica mantenimiento de los recursos naturales del medio, es por eso que se debe tratar de controlar el flujo constante de contaminantes producto de la explotación ganadera a gran escala y disminuyendo la entropíahacia el entorno. Es por eso que se pretende obtener una bacteria adaptada al ambiente del rumen y que sea modificada genéticamente para que se disminuyan las emisiones de metano producto de los procesos digestivos fermentativos del tracto gastrointestinal de los rumiantes por medio de la síntesis de la enzima metano monooxigenasa que transforma este gas contaminante.

2. OBJETIVOS OBJETIVOGENERAL Obtención de un microorganismo genéticamente modificado (Methanobrevibacter ruminantium) con la característica de degradar metano que es propia de las bacterias metanotróficas extremofilas (Methylocella silvestris) a través de la enzima metano monooxidasa.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS  Uso de la PCR para adquirir el gen especifico con el que se trabajara en la elaboración del nuevo organismogenéticamente modificado.  Contribuir a la solución de la problemática de la contaminación ambiental.  Determinar las posibles respuestas fisiológicas y nutricionales en los rumiantes y de impacto ambiental en el entorno las cuales se podrían obtener al implementar el microorganismo en campo

3. METANO MONOOXIGENASA (Methylocella silvestris BL2)

Methylocella silvesris BL2 es una bacteriametanotrófica acidófila que originalmente fue aislada de suelos ácidos forestales de Alemania. Es la primera metanotrofa facultativa totalmente autentificada. Crece no sólo en presencia de metano, sino también en algunos medios con piruvato, propano y succinato. Son abundantes en suelos ácidos y humedales donde ayudan a atenuar las emisiones de metano en esos hábitats. El tamaño del genoma es de 4,3Mbps, con un contenido de C+G del 63%. En total 3.917 genes y se encontraron 99 pseudogenes. [6] La enzima metano monooxigenasa (MMO) cataliza la oxidación de del metano en metanol, es la más importante para los metanotrofos. La MMO tiene dos formas distintas: una forma soluble en el citoplasma (sMMO) y la otra forma está asociada en el citoplasma (pMMO). La forma que se encuentra en la bacteria...