Técnicas Histologicas

PATOLOGIA ANIMAL
“TECNICAS HISTOLOGICAS”

Introducción

Las técnicas histológicas tienen que ver con la preparación del tejido ara su apropiada observación a través del microscopio ya sea este óptico o electrónico.
Dicho proceso es llevado a cabo porque la estructura de los tejidos se basa en la organización de los tipos de células de las cuales esta compuesta y las característicasmorfológicas de las células; existen diversos procedimientos a través de los cuales se observan los tejidos y células vivas, como:
* observación del flujo sanguíneo en capilares del sistema circulatorio.
* Técnicas histológicas supra-vítales: proceso en el cual las células y tejidos son cultivados fuera del organismo.
* Técnicas histológicas pos-vitales: las células mueren durante elproceso; pero se conservan las características morfológicas y moleculares en estado vivo, (dependiendo el tipo de técnica.)

Técnicas histológicas
Hace referencia al estudio para el reconocimiento de células y tejidos; la cual se lleva a cabo por una serie de pasos que dan como resultado un preparado que es observado con el microscopio óptico; proceso que inicia con la toma del material hasta elpreparado observable.

Pasos de técnicas histológicas:

1. toma de muestras:
El material debe de ser de un animal sano y normal, en lo posible extraerse de un animal vivo y anestesiado; en caso contrario debe extraerse los órganos sanos lo mas rápidamente posible después de la muerte.
La mayoría de las células consisten en una compleja membrana externa que rodea el protoplasma fluido,mezcla de soluciones de sales, proteínas, hidratos de carbono, lípidos, acidos organicos y enzimas.
Si las células no fueran fijadas muchas de estas sustancias se perderían por solución simple, por diálisis o por ingurgitación osmica de las células en el proceso que procede al corte y a la tinción.
Las moléculas grandes que forman complejos con otras para producir compuestos macromoleculares, sonlas que mejor se observan en un corte; un ejemplo de esto son:
* ácidos nucleicos: asociados con una proteína (nucleoproteína).
* Proteínas intracelulares del cito-esqueleto: forman complejos con otras proteínas.
* Proteínas extracelulares: asociados con otras moléculas vecinas que a través de enlaces cruzados (fibras colágenas) y fosfolípidos de las membranas.
En cuanto la sangre dejade llevar oxigeno a los tejidos y de extraerles anhídrido carbónico, las enzimas de las células empiezan a actuar y se produce la autolisis, las estructuras moleculares son deformadas, los tejidos y órganos se extraen:
* Las glándulas exocrinas y endocrinas rápidamente.
* Páncreas y riñón se extraen no más de 10 a 15 min- post-mortem.
* Intestino delgado y grueso, estomago, hígadose extraen no mas de 30 min.
* Músculos esqueléticos, huesos, piel, encéfalo, medula, ganglios nerviosos se extraen no mas de 60 min, post-mortem.
Material de necropsia: el examen debe ser realizado rápidamente antes de la muerte, si no es posible el animal debe ponerse a 4° C o someterse a embalsamiento por vía arterial
Si se extraen varios órganos deben registrarse cada trozo envolviéndoloen una gasa o pasando un hilo por un extremo del órgano y por el otro extremo se pone un pedazo de catalina resistente en donde se escriben las indicaciones (órgano, porción…).
Los fragmentos de órganos no deben ser mayores a 1 cm de espesor, se toman ángulos rectos y profundos para comprender: capsula, corteza, medula, etc. Pueden en ocasiones cortarse trozos d órganos de 2 o 3 cm y luego deun tiempo en el fijador se hacen cortes más pequeños.
Realizaciones de las secciones: los trozos de órganos tubulares se seccionan con tijeras, al extraerse los órganos deben seccionarse en fragmentos, utilizando una hoja de afeitar o bisturí; los bordes contados con tijeras se seccionan y desechan porque comprimen y deforman los órganos.

2. Fijación:
La fijación hace referencia a la...