Ultracentrifugacion

Facultad de Medicina
Departamento de Ciencias Básicas

Trabajo de Revisión Bibliográfica:

Ultracentrifugación

Alumnos: Bao Qi Cai
Giovanni Concha
Gian Fissore
Nicolás Gallardo
Martín Kelly
Esteban López
Gabriel Molina
Asignatura: Bioquímica I
Profesor: Reginald Del Pozo
Fecha: 7 de diciembre de 2012.

¿Qué es la ultracentrifugación?
Para tener una noción básica acerca estatécnica debemos conocer la centrifugación,
ya que como su nombre lo dice, la ultracentrifugación es una centrifugación aumentada o
exagerada, la cuál debido a sus grandes revoluciones no se le puede considerar como una
centrifugación normal.
La centrifugación es un método científico para la separación de mezclas, la cual se
basa en la diferencia de densidades dentro de los componentes de lamezcla a separar, ya
que esta última se coloca en un recipiente en el cual se hace girar a grandes velocidades,
por lo que con la ayuda de la fuerza de gravedad y la fuerza centrípeta se genera un enorme
potencial, el cual puede hacer sedimentar los compuestos químicos de mayor densidad.
Uno de los principios en que se basa esta técnica es: “todas las partículas, por poseer masa, se
venafectadas por cualquier fuerza (origen de una aceleración)”. Esta técnica se utiliza para
separar mezclas de células, partículas, orgánulos o moléculas.
Luego de aplicar una ultracentrifugación a una mezcla, se obtiene un sobrenadante,
que contiene los componentes menores y menos densos; y un precipitado, el cual posee los
componentes mayores y más densos del homogenado celular o mezcla a separar. Deesta
forma es mucho más fácil extraer el sobrenadante y obtener la porción deseada para nuestro
posterior estudio, el cuál tiene un sinfín de aplicaciones en muchos campos, como lo son la
medicina, la química, biología, etc. [1]
Para diferenciar lo que es una centrifugación y una ultracentrifugación, estas se
clasifican de acuerdo a la velocidad a la cual giran sus rotores, de acuerdo a lasrevoluciones por minuto, es así como se demuestra en la siguiente tabla:
Según velocidad.

Criterio aproximado.

Centrifugación a baja velocidad.
Centrifugación a alta velocidad.
Ultracentrifugación.

Menos de 10.000 rpm
Entre 10.000 y 20.000 rpm
Más de 20.000 rpm

De acuerdo al propósito con que se quiera utilizar la centrifugación se clasifica en:
 Centrifugación analítica: suobjetivo es estudiar las partículas que sedimentan (caen
al fondo del tubo que contiene la mezcla) desde un punto de vista físico. Aparecen
conceptos como coeficiente de sedimentación (concepto que se explica más
adelante) o masa molecular. Las moléculas están en un continuo monitoreo
mediante el uso de un sistema óptico.
 Centrifugación preparativa: Es lo que se utiliza con mayor frecuencia,ya que su
objetivo es separar moléculas específicas para un posterior estudio de estas mismas.
En general se utiliza mayor muestra que en la centrifugación analítica.

También existe otro tipo de clasificación de la centrifugación de acuerdo al criterio con el
cual se separan las distintas partes de la muestra en estudio:
 Centrifugación diferencial: Se utiliza principalmente un rotorangular, esto quiere
decir que, el sitio específico en donde se depositan los tubos con la muestra, tiene
un ángulo fijo con respecto a la vertical. La separación es en base al tamaño de las
diferentes partículas que circulan por la disolución, sin embargo también se pueden
separar según el coeficiente de sedimentación, lo que es menos frecuente. Su uso se
aplica a la separación de tiposcelulares, fraccionamiento subcelular, separación de
asociaciones submoleculares, etc.
 Centrifugación zonal o de velocidad de sedimentación: Se utiliza un rotor
basculante (los tubos parten vertical y a medida que giran quedan con un ángulo de
90° con respecto a la vertical) y su separación es, como bien lo dice su nombre, en
base al coeficiente de sedimentación (dependiente de la masa y forma),...