Ultracentrifugacion

Ultracentrifugación
La Ultracentrifugación se ha convertido en una herramienta indispensable para el aislamiento de proteínas, ácidos nucleicos y partículas subcelulares.
El tamaño, la forma y ladensidad de una sustancia son factores que determinan si se asientan o no en un medio liquido, la densidad y la viscosidad de éste también son decisivas para la sedimentación, si un componente de unasolución es mas denso que el medio, la fuerza centrifuga hará que se concentre en el fondo de uno de sus tubos, por tanto las partículas pequeñas se sedimentan con menos rapidez que las mas grandes consimilitudes en forma y densidad. Esta tendencia que marca la centrifugación se contrarresta por los efectos de la difusión (ocasiona que las moléculas se redistribuyan en modo mas uniformealeatorio), este problema se vio solucionado con el desarrollo de centrifuga de hasta 500000 veces la fuerza de la gravedad. La centrifugación se realiza en un ambiente casi de vacio para minimizar laresistencia por fricción. En el estudio de los ácidos nucleicos se utilizan dos técnicas de centrifugación; la sedimentación por velocidad (zona de velocidad) y la centrifugación de equilibrio (isopicnica). Enla primera los ácidos nucleicos se separan según la longitud del nucleótido. La muestra que contiene el acido nucleico se divide en capas sobre una solución que contiene una concentración ascendentede sacarosa, este gradiente aumenta la densidad desde la superficie al fondo, cuando se da la centrifugación las moléculas se mueven por el gradiente a una velocidad determinada por su coeficiente desedimentación. A mayor coeficiente de sedimentación, mas lejos se mueve la molecula en un periodo determinado se centrifugación, la centrifugación nunca alcanza un equilibrio. Después de un tiempodeterminado, el tubo se retira de la centrifuga, su contenido se fracciona y se determinan las posiciones relativas de las diversas moléculas. En la segunda las moléculas se separan según su densidad...