Variante Du

Practica no. 2
Variante “DU”
Fundamento: Bajo el termino Du se engloban todos los Ag D o Rh + débiles. En el laboratorio la investigación del Ag Du se lleva a cabo mediante una prueba de Coombsindirecta o bien mediante enzimas.
Se aconseja la determinación del Rh débil en los siguientes casos:
* En la mujer embarazada y el RN de madre Rh -
* En los centros de transfusión al determinarel Rh de los donantes
Esta reacción puede hacerse visible añadiendo anti globulina humana, después de que se haya producido la reacción Ag- Ac entre el Du de los hematíes problema y el suero anti- Dusado como reactivo.
Objetivo: Que el alumno determine si se encuentra la el antígeno Du en los hematíes del paciente mediante la determinación con esta práctica.
Equipo:
* Baño MaríaMaterial:
* Gradilla
* Tubo de ensaye
* Pipeta Pasteur
Material biológico:
* Sangre con EDTA
Técnica
1. Marcar 2 tubos (12 x 75) (control & problema)
2. Colocar en cadatubo 1 gota de la suspensión de eritrocitos al 5%
3. En el tubo problema agregar 1 gota de anti “D”
4. En el tubo de control agregar una gota de albumina al 22%
5. Centrifugar 15 segundosa 3400RPM
6. Observar si hay o no aglutinación
7. Incubar 30min a 37°C
8. Centrifugar 15 segundos a 3400 RPM
9. Observar presencia o ausencia de aglutinación
10. Lavar 3 vecescon solución salina al 0.9%
11. Agregar 2 gotas del suero de coombs (anti globulina humana)
12. Centrifugar 15 segundos a 3400RPM
13. Observar presencia o ausencia de aglutinación14. Si no hay aglutinación agregar 2gotas de células sensibilizadas (células control de coombs)
15. Centrifugar 15 segundos s 3400RPM
16. Observar & anotar resultados
Interpretación deresultados:
Si al agregar el suero de coombs no hay presencia de aglutinación (la variante de DU) se reportara como negativa. Esta prueba queda validada tanto como el resultado en tubo control,...