Vida de un joven

Practica 6
Hidrólisis de una proteína y ensayos para proteínas y aminoácidos
Objetivos
Efectuar la hidrólisis total de una proteína
Identificar algunos aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína, por medio de sus propiedades físico-químicas.
Identificar por cromatografía en placa fina algunos de los aminoácidos presentes en un hidrolizado de proteína.
Introducción
Las proteínasson biopolímeros de a-aminoácidos, el grupo amino esta enlazado al átomo de carbono alfa, átomo más próximo al grupo carbonilo. Las propiedades físicas se determinan a partir de los aminoácidos que las forman.
Las subunidades de aminoácidos individuales están unidas mediantes enlace amida, conocidos como enlaces peptídicos.
SE PUEDEN CLASIFICAR DE ACUERDO A SU COMPOSICION:
Proteínas Sencillas:Son biomoleculas estructuradas exclusivamente por alpha-aminoácidos en enlaces peptídicos como, Albúminas, Histonas, Glutaminas, esclero proteínas.
Proteínas Conjugadas:
Consisten en proteínas simples combinadas con algún componente no proteico

SE PUEDEN CLASIFICAR DE ACUERDO A SU MORFOLOGIA Y SOLUBILIDAD:
Proteínas fibrosas o estructurales:
Estructura alargada, fibrosas
Gran resistenciaFormada por largos filamentos de proteínas, de forma cilíndrica.
No son solubles en agua.
Constituyen: piel, músculos, cabellos, etc.
Proteínas Globulares:




Proteínas pequeñas ó Naturaleza más o menos esférica:
Debido a su distribución de aminoácidos (hidrófobo en su interior e hidrófilo en su exterior) que son muy solubles en las soluciones acuosas.
Transportadores de oxígeno(hemoglobina), catalizadores biológicos (enzimas); mediadores químicos (hormonas), sistema inmune (anticuerpos), etc.

Las proteínas están formadas por estructuras fundamentales llamadas aminoácidos, se encuentran unidos entre sí formando enlaces peptidicos en una cadena larga.
El enlace peptídico es plano y por tanto no existe rotación alrededor del enlace.
El enlace peptídico posee un carácter dedoble enlace, lo que significa que es más corto que un enlace sencillo y, por tanto, es rígido y plano
Esta característica previene la libre rotación alrededor del enlace entre el carbono carbonílico y el Nitrógeno del enlace peptídico. Aun así, Hay libre rotación alrededor de los enlaces Cα-C y Cα-N; su única limitación está dada por el tamaño del grupo R.

Hidrólisis de proteínas

Rupturade la estructura primaria, fragmentándose en aminoácidos.
3 TIPOS DE HIDRÓLISIS:
Hidrólisis Ácida
Hidrólisis Básica
Hidrólisis Enzimática
HIDRÓLISIS ÁCIDA:
Ebullición prolongada de la proteína con soluciones ácidas fuertes. (HCl, H2SO4).
Destruye completamente el tripofano y parte de la serina y la treonina.
HIDRÓLISIS BÁSICA:
Respeta los aminoácidos destruidos por la hidrólisis ácida,con gran facilidad de formar racematos.
Normalmente se utiliza NaOHBaOH

HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA:
Enzimas proteolíticas cuya actividad e lenta e incompleta
No se produce racemización
No se destruyen aminoácidos
Es muy específica.


Desarrollo
Se coloco en un matraz 1 mL de grenetina, 10 mL de HCl concentrado y 10mL de agua destilada a calentar con un refrigerante en posición de reflujo por35 minutos para generar la solución “A”. efectuando así una hidrólisis acida.

Para preparar la solución b se tomo 5 mL de la solución A y se neutralizo con NaOH al 10%.
Reacciones de identificación
1. Reacción Xantoproteica
Se coloco en dos tubos de ensaye 2 mL de solución A y B respectivamente, se les agrego ácido nítrico concentrado y se calentó suavemente en un baño maría agitando, sedejo enfriar y se le agrego a cada tubo NaOH al 10% hasta el pH básico y se observo el cambio de color



Esta reacción nos sirve para identificar aminoácidos con grupos fenilos que están unidos; como en la tirosina o la fenilalanina.
2. Reacción de precipitación
Se coloco en 3 tubos de ensaye, respectivamente, 2 mL de solución A, 2 mL de solución D y al último 2 mL de agua destilada. A los...