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INTRODUCCIÓN
La cámara de Neubauer es un instrumento utilizado para realizar el recuento de esporas y células en un medio líquido, que puede ser un cultivo celular, sangre, etc. Esta cámara de recuento está adaptada al microscopio de campo claro o al de contraste de fases.
Se trata de una gruesa placa de cristal con forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y unos 4 mm de grosor. En unacámara simple, la porción central, que es donde se realiza el conteo, está dividida en 3 partes. En la parte central se encuentra grabada una retícula cuadrangular. En el caso de cámaras dobles, que son las más comunes, existen 2 zonas de conteo, una superior y otra inferior al eje longitudinal de la cámara.
La retícula completa mide 3 mm x 3 mm de lado. Subdividida a su vez en 9 cuadrados de 1mm delado cada uno. En caso de recuento de sangre, los cuadrados de las esquinas son los destinados al recuento de leucocitos. Al existir estos en menor número que los hematíes, se necesitan menos líneas de referencia para realizar el conteo. El cuadrado central es el destinado al recuento de hematíes y plaquetas. Se divide en 25 cuadrados medianos de 0,2 mm de lado, y cada uno de estos cuadros sesubdivide a su vez en 16 cuadrados pequeños. El cuadrado central está por tanto formado por 400 cuadrados pequeños.
CUBREOBJETOS. El cubreobjetos es un cuadrado de cristal de aproximadamente 22 mm x 22 mm. Debe colocarse sobre la cámara de recuento de forma que cubra la parte central de la cámara, delimitando un espacio entre la cámara y el cubreobjetos de 0,1 mm.
PIPETA: Se trata de uninstrumento de laboratorio que permite medir alícuota de líquido con bastante precisión. Típicamente han sido principalmente de vidrio, pero en la actualidad se utilizan ampliamente las micro pipetas, que tienen puntas esterilizadas desechables. Las más habituales están calibradas para una capacidad máxima de 20, 200 y 1000 uL . Las pipetas de mezclado de sangre utilizadas son la pipeta de leucocitos (perlablanca) y la pipeta de eritrocitos (perla roja).
FUNDAMENTO PlaquetasLas plaquetas son los elementos formes más pequeños de la sangre. Son extremadamente frágiles y se adhieren muy fácilmente a otros cuerpos cercanos (linfocitos, eritrocitos etc.), o se aglutinan entre ellas formando coágulos, de todos los tamaños o formas. Tienen un diámetro de unas 2μ. Son poco densas y flotan en el plasma. Desu masa seca un 60% es proteína y un 15% de lípidos. Ademas son corpúsculos anucleados con multitud de gránulos citoplasmáticos que son segregados durante su activación. Se forman en la médula ósea, mediante un proceso denominado trombopoyesis. En condiciones normales se forman 40.000 mm3/día.
Las plaquetas o trombocitos se encuentran en número de 150.000 a 400.000 por mm3 de sangre. Ladisminución en el número de plaquetas (por debajo del límite menor normal) se denomina trombocitopenia y el aumento en el número de las mismas (superior al límite normal más alto) se llama trombocitosis.
Sus funciones son formar nudos de red de fibrina, liberar sustancias importantes para acelerarla, mantenimiento de la integridad vascular, interrupción inicial de la hemorragia mediante la formación deltapón plaquetario, clavo plaquetario o trombo blanco, estabilización del tapón mediante los factores necesarios para la formación de fibrina, retracción del trombo y restauración del endotelio vascular mediante la producción de factores de crecimiento.
Trombopoyesis: De la célula precursora se diferencian los megacarioblastos, después los megacariocitos y al fragmentarse dan lugar a lasplaquetas.
OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es que el alumno o alumna adquiera la capacidad de realizar con éxito la medición y diferenciación de las plaquetas, con la finalidad de implementarlo correctamente en un trabajo futuro o bien para ayudar al médico que lo solicite para dar un diagnóstico.
MATERIALES
Equipo de vacurtainer
Tubo de EDTA
Cámara de Neubauber
Pipeta de toma para...