CARTEL BIOQUIMICA

¿SE PUEDE SEPARAR UNA MEZCLA DE AMINOÁCIDOS POR CROMATOGRAFÍA?
CONCLUSIÓN
Efectivamente una mezcla de aminoácidos puede ser separada mediante cromatografía.
DISCUSIÓN

PRINCIPIOS GENERALES
Cuando se distribuye un soluto entre volúmenes de dos líquidos inmiscibles, la relación de concentraciones del
soluto entre las dos fases en equilibrio a una temperatura determinada recibe el nombre decoeficiente de reparto.
En todas las separaciones cromatografías, las moléculas son fraccionadas dentro de una fase estacionaria y una
móvil. La separación depende de la tendencia relativa de las moléculas en la mezcla de asociarse con mas fuerza a una o a otra fase.
Para la separación de los aminoácidos, los solventes son mezclas polares binarias, ternarias o mas complejas
de agua, alcoholes y ácidos obases. El componente mas polar del solvente se asocia con la celulosa y forma la
fase estacionaria. Los componentes menos polares constituyen la fase móvil.
El uso de la cromatografía en papel para la separación e identificación de aminoácidos es de gran importancia
ya que se engloba dentro de las llamadas técnicas de separación y permite el análisis de mezclas complejas de
compuestos muyestrechamente relacionados químicamente.

El disolvente utilizado para la cromatografía fue una mezcla de n-butanol, ácido acético glacial y agua (4:1:5), al observar la
cromatografía nos percatamos de que el coeficiente de reparto mayor fue el de la leucina, un aminoácido no polar, el segundo más alto lo tuvo la prolina y finalmente el aminoácido con menor arrastre fue la lisina.
Esto se debe a que en eldisolvente se tiene al n-butanol, una sustancia no polar, por lo tanto y como ya se ha explicado en el
fundamento, debido a la polaridad que presenta el n-butanol y sabiendo que lo semejante se disuelve con lo semejante, los
aminoácidos que presentaron un mayor factor de dilución, como la leucina y la prolina, son aminoácidos no polares por ello
al tener mejor afinidad con el disolvente suarrastre es mejor.
Sin embargo debido a la hidratación que tiene la celulosa, por consecuencia del agua (polar) y recordando que esta nos sirve
como fase estacionaria, los aminoácidos polares quedaran retenidos y por lo tanto su arrastre será menor este es el caso de
la lisina.
El coeficiente de reparto obtenido va a depender en gran medida del disolvente utilizado para la cromatografía, ya que debido alas diferencias de polaridades, la afinidad entre disolvente y aminoácido varia. De acuerdo con la práctica realizada y lo
reportado teóricamente se tiene los siguientes resultados:
Como se puede observar en la tabla los resultados obtenidos en la práctica no tienen una variación tan grande con los reportados teóricamente

PRINCIPIOS
El principio antes descrito, es el implicado en la cromatografíade papel de los aminoácidos. El reparto
ocurre entre el agua que hidrata la celulosa y la fase móvil orgánica. A medida que un disolvente que contiene una mezcla de aminoácidos asciende por capilaridad por el papel, se producen multitud de distribuciones microscópicas de los aminoácidos entre la fase que influye y la fase estacionaria acuosa, ligadas a
las fibras de papel.
Al final del procesolos diferentes aminoácidos han recorrido diferentes distancias desde su origen, esto
debido a la polaridad que presenten dichos aminoácidos, por lo tanto un factor de retención alto indica
una gran afinidad del compuesto por el disolvente y si el eluyente es polar va a jalar consigo a los compuestos polares por el contrario si no es polar, entonces jalara a los compuestos no polares.
Para ladeterminación cualitativa y cuantitativa de aminoácidos, el más general y utilizado es el de la
reacción con la ninhidrina. La ninhidrina (hidrato de tricetohidrindeno) reacciona con aminoácidos que
tengan el grupo amino libre, dando lugar a la formación de amoniaco y anhídrido carbónico, con reducción del reactivo (ninhidrina) a hidrindantina (Figura 1). La hidrindantina reacciona a su vez con el...