caso clinico


1. TEMA:

Actividad enzimática de los peróxisomas y desnaturalización de las proteínas mediante medios físicos y químicos.

2. OBJETIVO GENERAL

Determinar la Biodiversidad Microbiana

3. OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

1) Comprobar la existencia de microorganismos en las muestras.
2) Realizar una apropiada muestra en fresco.
3) Identificar los Microorganismos presentes en las muestras.4. REVISIÓN BIBLIOGRÁFICA

4.1. Desnaturalización de Proteínas.

Es la modificación que ocurre en la estructura nativa de una proteína, alterando así sus propiedades. Envuelve alteraciones de la estructura 2°,3° y 4° de las proteínas. La estructura 1° se mantiene. Las alteraciones que se observan son disminución de la solubilidad y/o pérdida de la actividad biológica. La disminución de lasolubilidad puede ser explicada por la exposición de radicales hidrofóbicos que perjudican la interacción proteína-agua y favorecen la interacción proteína-proteína.
Agentes desnaturalizantes
Calor: la agitación térmica afecta las interacciones que estabilizan la estructura tridimensional de las proteínas (puentes H, interacción hidrofóbica)
Ácidos: se combinan conproteínas con carga + formando complejos proteínatos insolubles.
Sales de metales pesados: se combinan con proteinas de carga formando proteinatos insolubles.Solventes orgánicos: presentan corriente dieléctrica inferior al agua entonces la atracción entre cargas opuestas es alta. (precipitación)
4.2. Acción enzimática de la catalasa sobre el Peróxido de Hidrógeno.

Muchos organismos pueden descomponer el peróxido de hidrógeno (H2O2) por acción enzimática.
Si el ambiente donde se encuentra la enzima es demasiado ácido o demasiado básico,la enzima puede desnaturalizarse de forma irreversible o transformarse de modo que su forma no le permita más realizar su funcionamiento apropiado.
El H2O2 es tóxico para la mayoría de los organismos vivos. Muchos organismos son capaces de destruir el H2O2 mediante la acción de enzimas antes de que pueda realizar mucho daño. El peróxido de hidrógeno se convierte en oxígeno molecular y agua segúnla siguiente reacción:

2H2O2 2H2O + O2

Aunque esta reacción ocurre espontáneamente, las enzimas incrementan la velocidad de reacción de forma considerable. Se conoce que al menos dos enzimas diferentes catalizan esta reacción: a) catalasa, que se encuentra en animales y protistas; b) peroxidasa, que se encuentra en las plantas. (Myron L. 1977)

4.3. Catalasa

Es una enzimahemoproteica y oxidorreductora que se encuentra en multitud de seres y tejidos especial y únicamente en los peroxisomas. Su sustrato es el agua oxigenada a la cual descompone en agua y oxigeno molecular que se desprende en forma de burbujas y se van a la atmósfera. (Armstrong F.B. 1982)

4.4. Peróxido de Hidrógeno

El peróxido de hidrógeno (H2O2), también conocido como agua oxigenada, es un compuestoquímico con características de un líquido altamente polar, fuertemente enlazado, que por lo general se presenta como un líquido ligeramente más viscoso que ésta. Es conocido por ser un poderoso oxidante. En la célula es producida por las enzimas de los peroxisomas en respuesta de procesos metabólicos. (Armstrong F.B. 1982).

5. MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

MATERIALES
REACTIVOSBIOLOGICO
REACTIVOS

Tubos de ensayo
Hígado de Pollo
Peróxido de Hidrógeno (3%)

Gradilla
Riñón de Pollo
Hidróxido de Sodio

Cuchillo
Papa
Etanol

Cuchara
Apio
Ácido clorhídrico

Corchos



Mechero a gas



Tijeras



Jeringuillas



Fósforos



Marcador
para CD




6. PROCEDIMIENTO

6.1. Método con Peróxido de Hidrógeno.

a) Rotular cada tubo de ensayo...