Cromatografia
La cromatografía funciona con el mismo principio que el de la extracción, pero en este caso una fase se mantiene fija y la otra se mueve a través de ella. Es la técnica más desarrollada en los últimos años, empleada en la química analítica. Su empleo presenta notables ventaja es sencilla, rápida y no requiere aparatos complicados, abarca escalas micro analíticas hastaescalas industriales, es una técnica poco o nada destructiva que puede aplicarse a sustancias lábiles.
Constituye una metodología imprescindible en estudios bioquímicos, toxicológicos, estructurales, etc. No solo utilizando como técnica de separación e identificación, sino como método preparatorio, incluso a escalas industriales. La palabra cromatografía proviene de kromatos, color y graphos,escrito. Una de las definiciones de la técnica más correcta seria, la dada por Keulemans: "Método físico de separación en el que los componentes a separar se distribuyen en dos fases, una de las cuales constituye un hecho estacionario de gran desarrollo superficial y la otra un fluido que pasa a través o a lo largo del lecho estacionario (fase móvil)." En todo proceso cromatografico la fase móvil esla que provoca un movimiento de las distintas especias para que abandonen el medio soporte, y la fase estacionaria la que suministra el efecto retardador, selectivo para cada componente, que condiciona que cada uno de ellos se desplace con distinta velocidad.
Fundamento de la cromatografía
La cromatografía se basa en un conjunto de técnicas asociadas al principio de retención selectiva. Permiteseparar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.
Posee: Fase móvil: consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico), fase estacionaria: se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido, los componentes de la mezcla interaccionan en forma diferente con la fase estacionaria y con la fase móvil, los componentesatraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando.
Clases de cromatografía.
Son clasificados según el estado físico de la fase, el mecanismo de separación y el tipo de soporte. La fase móvil puede ser un gas o un líquido, y la estacionaria u líquido o un sólido. Se pueden establecer cuatro tipos de cromatografía: gas-líquido, líquido-líquido, gas-sólido, líquido-sólido.Los mecanismos por los que los diferentes componentes son separados en los procesos cromatograficos son variados. En algunos casos participan más de un mecanismo en un mismo proceso de separación por lo que dificulta la 2 clasificación. Los principales mecanismos que intervienen en la separación cromatografica son: Adsorción: es una fase estacionaria sólida y una fase móvil liquida o gaseosa. Elsoluto se adsorbe en una superficie de las partículas sólidas. Cuando más fuertemente se adsorbe un soluto, más lentamente atraviesa la columna. Reparto: utiliza una fase estacionaria liquida, en forma de una fina película de alto punto de ebullición sobre la superficie de un soporte sólido, que en cromatografía de gases es, típicamente, la cara interna de una columna de cromatografía de sílice.El soluto está en equilibrio estacionario y la fase móvil, que es en cromatografía de gases el gas que fluye. Intercambio Ionico: La fase estacionaria constituida por un sólido intercambiando iones con iones contenidos en la fase móvil, liquida. El intercambio de iones sólido-solución está regulado por la afinidad química de los iones con ambas fases y por sus respectivas concentraciones. TamañoMolecular: Especies neutras de alto peso molecular pueden ser separadas en virtud de su tamaño donde la fase estacionaria es un gel hidrofilico altamente poroso que retiene las moléculas de menor tamaño al de los poros. Las moléculas de mayor tamaño son retardadas en su paso por pequeñas fuerzas de adsorción de la superficie externa del gel que luego son excluidas de la fase estacionaria....
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