Cultivo in vitro
La historia del cultivo in vitro de tejidos vegetales se remonta a unos 200 años, con la "Teoría de la Totipotencia "formulada por Schwann y Schleiden (1838). A partir de esta teoría nació el cultivo de tejidos y células vegetales.
Un siglo después, Nobécourt, Gautheret y white (1939) consiguieron el primer cultivo de tejidos vegetales auténtico in vitro. A partir de ése entonces ycon los descubrimientos de las fitohormonas auxina y citoquinina (1955), el desarrollo en este campo ha sido meteórico.
El cultivo in vitro de define como "El cultivo sobre un medio nutritivo, en condiciones estériles, de plantas, semillas, embriones, órganos, explanto, tejidos, células y protoplastos de plantas superiores" (Pierick, 1990).
La técnicas de cultivo in vitro, se caracterizan porocurrir a micro escala, en condiciones ambientales optimizadas, en un ambiente estéril y generalmente no responden al patrón normal de desarrollo de una planta, pudiendo un tejido aislado originar un callo o embriogénesis somática, por ejemplo.
Hoy en día, en nuestro país, la propagación in vitro, embriogénesis somática y organogénesis son las principales técnicas de propagación vegetativa paraárboles de interés forestal. Se han logrado importantes avances, como por ejemplo la micropropagación de especies recalcitrantes a estas metodologías.
Estas técnicas comenzaron en los años 40 y representan una útil herramienta porque permite:
* Manipular genotipos en un periodo más corto de tiempo.
* Requerir de pequeñas cantidades de material de partida
* Superar las dificultadesque presenta la propagación vegetativa en algunas especies.
* Obtener plantas libres de enfermedades
* No estar condicionados por las estaciones del año
* Obtener un alto número de individuos en un corto período de tiempo.
En genética se puede utilizar en:
* Conservación de germoplasma
* Cultivo de embriones inmaduros
* Obtención dehaploides
* Embriogénesis somática
* Mejoramiento genético de especies
* Recuperación de clones no viables
En el caso de las coníferas, sobre todo en especies del género Pinus, es difícil la regeneración de plantas viables a partir de los protoplastos por lo que la organogénesis es la forma principal de regenerar Pinaceas in vitro.
El cultivo de especiesforestales in vitro, ha dado un mayor impulso y eficiencia a algunas estrategias ya utilizadas en campo, ahorrando tiempo y dinero.
La posibilidad de propagar asexualmente y cultivar individuos seleccionados, incrementaría el rendimiento productivo de las empresas.
El término genérico “cultivo de tejidos vegetales” involucra a diferentes técnicas de cultivo de material vegetal diverso,incluyendo a los protoplastos (células desprovistas de su pared celular), células, tejidos, órganos y plantas completas. Mediante éstas y otras técnicas de cultivo, es posible obtener plantas libres de microbios en un medio nutritivo aséptico (estéril) en condiciones ambientales controladas. También se lo conoce como “cultivo in vitro de plantas” por realizarse enrecipientes de vidrio (hoy también de otros materiales).
Las primeras experiencias relacionadas con el cultivo de tejidos vegetales se remontan a 1902, pero recién en 1922 se logró el primer experimento exitoso: la germinación in vitro de semillas de orquídeas.
Luego de la germinación, las plántulas obtenidas se transfirieron a un medio de cultivo en condiciones asépticas, y así se mantuvieronprotegidas del ataque de patógenos (hongos, virus y bacterias).
Hoy esta técnica tiene numerosas aplicaciones:
* Propagación masiva de plantas, especialmente para especies de difícil propagación por otros métodos, o en vías de extinción
* Clonación de individuos de características agronómicas muy deseables durante todo el año
* Obtención de plantas libres de virus...
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