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1.6          MÉTODOS DE CALIBRACIÓN

1.6.1 MÉTODOS DE CALIBRACIÓN

Las Técnicas Instrumentales son técnicas relativas, no absolutas por lo que es necesario relacionar la propiedad medida con la concentración de analito a través de curvas de calibrado.
El método más frecuente para construir una curva de calibrado es el de Regresión por Mínimos Cuadrados, en éste modelo se obtiene una rectaen el que los cuadrados de los residuos se hacen mínimos.

El procedimiento de calibración en análisis instrumental consta de 4 etapas:

1) Preparar una serie de patrones con concentraciones conocidas y normalmente se preparan 4 o más patrones. Lo que hay que intentar es que la concentración de los patrones esté igualmente estacionada (equidistantes), de ésta manera se cometen menos errores.2) Medir los patrones en el instrumento en unas condiciones determinadas.
3) Construir la gráfica de calibración a partir de la concentración del analito en los patrones y de las señales obtenidas.
4) Preparar la muestra de misma forma que hemos preparado los patrones, y medirla en el instrumento en las mismas condiciones, y por último con la señal obtenida determinar su concentración a partir dela recta de calibrado obtenida.

Calibración de los métodos instrumentales

Todos los métodos instrumentales, excepto dos, requieren una calibración, proceso que relaciona la señal analítica medida con la concentración del analito. Los tres métodos más frecuentemente utilizados para la calibración son: la realización y el uso de una curva de calibrado, el método de la adición estándar y elmétodo del patrón interno.

" Las dos excepciones son. el método gravimétrico y el cu-lombimétrico. En ambos casos, la relación entre la cantidad medida y la concentración de anaiito se puede determinar a partir de las constantes físicas conocidas con exactitud.

El término matriz se refiere al conjunto de los distintos componentes que constituyen una muestra analítica. La matriz incluye, ademásdel analito, todos los demás componentes de la muestra, a los que, a veces, se les llama concomitantes.

Curvas de calibración:

Curva o gráfica analítica:

Consiste en preparar los patrones que se van a utilizar en la etapa de calibración en disolvente. También es necesario preparar el Blanco que contenga todos los reactivos excepto el analito problema, supuestamente debería de dar medidacero, pero a veces no es así debido a impurezas. Por lo que se hace es restarle a las señales de los patrones al blanco.

Una vez hecho, ajustamos por mínimos cuadrados y obtenemos una curva:

Método de adición de Patrón o Método de adición Estándar

En ocasiones la interacción del analito con otros componentes puede producir una exaltación o una inhibición de la sensibilidad del analito,conocido como Efecto Matriz. Se puede detectar utilizando el método de adición Estándar o de Patrón, y consiste en preparar una serie de patrones y a cada uno de ellos añadir una misma cantidad de la muestra problema.

Además se prepara otra que lleva la muestra problema pero no el patrón del analito:

Se usa cuando es imposible suprimir las interferencias tanto físicas como químicas de la matrizde la muestra. Lo único que se corrige con éste método es el efecto matriz:

Si los puntos cambian: exaltación o inhibición de la señal, cometiendo un error por exceso o por defecto:

Pero estas curvas no corrigen el Efecto de Fondo, es decir, que hay una señal adicional debida a otros componentes de la matriz, no es que el componente interaccione y cambie la señal sino que tengo uncomponente de fondo. Se corrige con un método llamado Blanco de YOUDEN (el efecto fondo de la matriz es un error constante).

Los Inconvenientes:

a) Que es un método de extrapolación, por tanto es mucho menos preciso, se comete un error. Esto no ocurre en el método de la curva porque es un método de interpolación y la señal es proporcional a la concentración.
b) Requiere mucha más cantidad de...