Electroforesis

La electroforesis es el movimiento de partículas cargadas en un campo eléctrico. A diferencia de las proteínas, las cuales pueden tener una carga positiva o negativa, los ácidos nucleicos estáncargados de forma negativa debido a su esqueleto de grupos fosfato. Por lo tanto, en una electroforesis, los ácidos nucleicos migrarán hacia el polo positivo, es decir, el ánodo.

Pasos de laelectroforesis
Aparte de la acrilamida, la agarosa (polisacárido extraído de las algas) puede ser utilizada como soporte para la corrida electroforética ya que tiene la propiedad de mantenerse en estado sólidoa temperatura ambiente pero que a altas temperaturas se torna líquida. Esta característica permite una fácil preparación de una matriz porosa para ser usada en electroforesis: simplemente se pesa lacantidad de agarosa requerida, se disuelve en un amortiguador adecuado, se calienta y se “chorrea” sobre un molde particular. La concentración de agarosa típicamente utilizada para electroforesisestá entre el 0.5 % y el 2%. La concentración a usar se escoge según el tamaño del ácido nucleico a analizar. Esto porque la concentración de agarosa define el tamaño de los poros de la matriz, a mayorconcentración, menor el tamaño de los poros y viceversa. Durante la electroforesis, los ácidos nucleicos lineales con un alto peso molecular migrarán al ánodo más lentamente que ácidos nucleicoslineales con un menor peso molecular. La razón de esto es que los ácidos nucleicos de alto peso tardan más tiempo en atravesar los poros de agarosa.
Una electroforesis típica consiste de los siguientespasos:

1. Preparar un gel de agarosa a la concentración requerida
2. Mezclar las muestras a analizar con un amortiguador adecuado y un colorante (azul de bromofenol) el cual indica el frente decorrida de la electroforesis
3. Montar las muestras en el gel
4. Realizar la corrida electroforética
5. Visualizar los ácidos nucleicos.

Para la visualización de los ácidos nucleicos se...