Genetica Forense

Genética Forense
La genética forense resuelve casos de delito sexual y homicidios mediante la correcta recolección de las muestras de ADN de violaciones u homicidios que pueden encontrarse en semen de la ropa, del suelo o de las paredes del lugar del crimen, trozos de piel de debajo de las uñas, flujo vaginal, un diente, determinados huesos e inclusive saliva. Generalmente son muestras muypequeñas por eso se utilizan tres técnicas las más utilizadas para amplificarlas y compararlas con los posibles culpables ósea sospechosos. Se encuentran los Polimorfismos en la longitud de fragmentos de restricción (RFLP), el Número variable de repeticiones en tándem (VNTR) y la Reacción en cadena de la polimerasa (Rivas, Rodríguez, Vargas & Vindas, 2000).
Mediante la relación molecular que se puedatener con alguna persona, es posible definir sospechosos para un acto criminal, así como eliminar a quienes no tienen nada que ver con el hecho, teniendo en este último caso un 100% de seguridad al descartarse, mientras que en caso de que se observe alguna relación no es posible determinar si la persona es culpable o no. La genética forense ha ayudado a resolver muchos casos judiciales utilizandométodos e ideas que no serían posibles sin la ayuda de esta.

Reacción en cadena de la Polimerasa PCR
Es un método in vitro sintetizado donde se amplía mediante diferentes ciclos en termocicladores con distintas temperaturas un fragmento de ADN que se delimita por medio de un cebador o iniciador. Así en una cuestión de tiempo se obtienen millones de copias de un fragmento de ADN de interés(Malacarne, 2004). Para realizar este procedimiento se necesita una serie de sustancias para que se produzca el PCR que consta de tres etapas.
Se necesita de una solución amortiguadora como cloruro de potasio, gelatina o cloruro de magnesio generalmente el más usado. Los desoxirribonucleósidos trifosfatados (dNTPs) que son la base del nuevo fragmento de ADN son distinguibles por sus basesnitrogenadas. Afectan la especificidad del apareo (purina con pirimina) en las cadenas del ADN y la fidelidad. Estos captan los iones de magnesio por lo tanto tienen que tener una misma relación con estos.
Los cebadores o iniciadores son el factor del cual más depende el éxito del procedimiento, tienen una longitud aproximada de entre 18 y 30 nucleótidos, con un contenido de guanina más citosina de un 40%a un 75%. Los cebadores ideales carecen de estructuras segundarias y son complementarios al AND molde pero no entre ellos para que no se hibriden y evitar la creación de dímeros (Rodríguez, 2004). Normalmente se utilizan degenerados que son en realidad una mezcla de ellos de igual tamaño con unas diferencias de secuencia en posiciones específicas.
Una enzima polimerasa que funciones en altastemperaturas, la más usada es la Taq y la Vent que tienen temperaturas de catálisis de 72ºC e incorporan 100 nucleótidos por segundo siendo estables hasta por encima de los 92ºC.
La muestra de ADN que se necesita amplificar que puede ser de hasta 1 ng de material genético clonado en virus o plásmidos y de 20 ng de ADN genómico procedente de células eucariotas o ARN que sea transformado antes a ANDcpor medio de transcripción inversa (Rodríguez, 2004). Finalmente se utiliza agua destilada como solvente de todas las demás sustancias.
Etapas del PCR:
1. Desnaturalización: se rompen los puentes de hidrógeno de la doble banda del ADN para convertirlo en simples a una temperatura de 94ºC durante un minuto. (Robleto, 2000).
2. Alineamiento: se da una hibridación de las cadenas desnaturalizadasdel ADN blanco con los cebadores (ADN sintético o de cadena sencilla) (Rodríguez, 2004).
3. Extensión: la polimerasa termoestable empieza a actuar en el borde de los iniciadores y usando las cuatro bases sintetiza copias complementarias de cada uno de los filamentos del ADN en una temperatura de 70ºC a 72ºC.

Fragmento de Restricción de Longitud...