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- GUIA DE TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS 2008 INDICE
1. Interacción antígeno-anticuerpo

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2. Interacción Secundaria Ag-Ac

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2.a. Reacciones de precipitación

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2.b. Técnicas inmunológicas basadas en reacciones de precipitación.

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Inmunodifusión Radial

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Inmunoelectroforesis

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2.c. Reacciones de aglutinación

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2.d. Concepto de título

Página 53. Interacción primaria Ag-Ac
3.a. Inmunomarcación

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Inmunomarcación con Acs conjugados a ENZIMAS

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Inmunomarcación con Acs conjugados a FLUOROCROMOS

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Citometría de Flujo

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3.b. Radioinmunoanálisis y Técnicas radioinmunométricas

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3.c. ELISA (Enzime Linked ImmunoadSorbent Assay)

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4. Otras técnicas
4.a. Proteinogramaelectroforético

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4.b. Nefelometría

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4.c. Western Blot

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5. Técnicas de tipificación de antígenos de histocompatibilidad

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5.a. Técnicas serológicas

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5.b. Técnicas moleculares

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6. Cross match

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7. Técnicas inmunológicas para estudiar la funcionalidad de los fagocitos

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1. INTERACCIÓN ANTÍGENO-ANTICUERPO
La uniónantígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una interacción reversible en la que están involucrados enlaces nocovalentes. En la interacción in vitro de un antígeno (Ag) con su correspondiente anticuerpo (Ac) se
distinguen dos etapas, la interacción primaria no visualizable y la interacción secundaria, que sigue a la
anterior y se caracteriza por la aparición de un fenómeno visible como la aglutinación o la precipitación. Porotro lado, no siempre que se produce la interacción primaria Ag-Ac, se produce la interacción secundaria, ya
que, para conseguir fenómenos visibles, son indispensables determinadas concentraciones y características
de los Ags y Acs.
2. INTERACCIÓN SECUNDARIA ANTIGENO-ANTICUERPO.
Las técnicas inmunológicas que evidencian la interacción Ag-Ac a través de una reacción secundaria
(precipitación oaglutinación) son, generalmente, más económicas y sencillas que aquellas que permiten
visualizar la interacción primaria (ver más adelante).
2.a. Reacciones de precipitación
Al mezclar cantidades suficientes de Ag soluble con Acs específicos, la interacción Ag-Ac puede dar lugar a
una red capaz de ser visualizada como un precipitado. Esa red de la que hablamos, no es otra cosa que
grandes complejosinmunes (CI) formados por la interacción Ag-Ac. Tal como se observa en la figura, cuando
se agregan concentraciones crecientes de Ag soluble a una cantidad fija de suero conteniendo Acs
específicos, a medida que la cantidad de Ag agregado aumenta, la cantidad de precipitado se incrementa
hasta alcanzar un máximo, luego del cual declina.
En un extremo de la curva de precipitación, cuando se agreganpequeñas cantidades de Ag, los CI se forman
en exceso de Ac. En el otro extremo, al agregar grandes cantidades de Ag, los CI se forman en exceso de
Ag siendo pequeños y probablemente constituidos por una molécula de Ac y dos de Ag. Entre estas dos
situaciones extremas se encuentra la zona de equivalencia, en donde la relación Ag-Ac permite la formación
de grandes redes de CI que precipitan.
Exceso
deAc

Equivalencia

Exceso
de Ag

Cantidad de Ag agregado
La reacción de precipitación depende de la VALENCIA del Ac y del Ag. La valencia del Ac da idea del número
de sitios que posee para reconocer al Ag. De esta manera, un Ac bivalente posee dos sitios capaces de
reconocer al Ag. Del mismo modo, la valencia de un Ag nos habla del máximo número de epitopes que
posee. Para que se pueda producir lainteracción secundaria Ag-Ag con la consecuente formación del
precipitado, tanto el Ag como el Ac deben ser, al menos, bivalentes.

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La asociación entre Ac bivalentes y Ag
monovalentes (un único epitope no repetido)
no permite la formación de CI precipitantes.

La asociación entre Ac bivalentes y Ag
multivalentes permite la formación de CI
precipitantes. El Ag multivalente puede
presentar...