Hematoxilina

* HEMATOXILINA – EOSINA Esta técnica utiliza dos colorantes: en primer lugar los cortes se someten a la acción de la hematoxilina, colorante básico, que se une a cualquier sustancia que tenga grupos ácidos, tales como los grupos fosfato del ADN y a las proteínas nucleares que poseen carga negativa. A continuación, los cortes se someten a la acción de la eosina, colorante débilmente ácido, quecolorea a las estructuras básicas. |
RESULTADOS: las estructuras basófilas, como los núcleos, se tiñen de color azul con la hematoxilina, mientras que la eosina tiñe de rosa más o menos intenso estructuras acidófilas, como las fibras de colágeno.MIRA VIPER… ESTO DE ARRIBA ESTA PERFECTO COMO INTRODUCCION…LUEGO YA EMPEZAMOS EXPLICANDO BN CADA UNA Y DAMOS EJEMPLOS… | |
Hematoxilina (C.I. 75290) esun compuesto que se obtiene de la planta leguminosa Haematoxylum campechianum L., conocida también con el nombre de palo de Campeche. Es un producto natural que al ser oxidado constituye una substancia de color morado oscuro denominada hemateína.
Se utiliza en histología para teñir los componentes aniónicos (ácidos) de los tejidos, a los que da una coloración violeta. Tiñe intensamente losnúcleos de las células, dado que estos contienen ácidos nucleicos ricos en radicales ácidos.
Tal como se obtiene de la planta e incluso luego de sufrir el proceso de oxidación, su capacidad de tinción es muy limitada. Por lo tanto, debe combinarse con iones metálicos, especialmente las sales de hierro (III) o aluminio (II), que actúan como mordientes.
Si bien la hematoxilina es una sal neutra, sueleser denominada como un colorante básico, ya que el componente cromógeno reside en el complejo catiónico (básico) de la misma. Es de notar que la tinción histológica por hematoxilina no indica tanto la constitución química de los componentes celulares, sino la densidad de cargas eléctricas negativas de los mismos.
HEMATOXILINA:
Es un colorante vegetal. Para ser utilizada debe ser oxidadapreviamente. Los agentes oxidantes pueden ser: el aire (varios meses de exposición) u oxidantes artificiales (óxido de mercurio, permanganato de potasio, dicromato potásico, etc). Es un colorante directo, pero en la práctica se lo utiliza en forma de lacas hematoxilínicas (se utiliza alumbre de potasio o de sodio como mordiente para preparar la solución colorante comportándose en este caso como coloranteindirecto.
EOSINA:
Es un colorante artificial (se trata de derivados hidroxixanténicos halogenados con tres grupos arilo). Presenta autofluorescencia espontánea. Se la emplea tanto en soluciones acuosas como alcohólicas
En las células teñidas con H-E, algunos componentes nucleares son teñidos por la hematoxilina ( color azul a púrpura). La afinidad hacia la hematoxilina depende de laconcentración de ácidos nucleicos. En la mayor parte de las células son las proteínas estructurales teñidas por la eosina ( color rosado a rojo ). La magnitud en la cual se tiñen estas proteínas es modificada por el pH de la solución colorante.
COLORACIÓN
Tinción de hematoxilina-eosina
La hematoxilina es un colorante natural sin capacidad tintorial, por lo que hay que oxidarla.
El proceso de oxidación dela hematoxilina se conoce como maduración de la hematoxilina. La hemateína no posee fijación por los tejidos por lo que hay que añadir un mordiente que actúe como vinculante entre el tejido y el colorante, acrecentando la unión entre ambos. El mordiente más utilizado es el alumbre potásico AL K(SO4)2 y también se utiliza el sulfato de aluminio potásico. La unión de hemateína más mordiente se llamahemalum o hemalumbre.
La hematoxilina es un colorante básico que va a teñir estructuras ácidas y basófilas (núcleos celulares).
Existen distintas lacas alumínicas de hematoxilina:
- Hematoxilina de Harris: Muy utilizada por su estabilidad (se conserva entre 6-12 meses) y por su fácil manejo.
Es una coloración regresiva, se elimina el exceso de colorante con alcohol. Como agente oxidante se...