Laboratorio inmuno

Pruebas Inmunológicas de Laboratorio
Tema 20

Reacciones de Precipitación

Las reacciones de precipitación, son las mas simples de las reacciones antígeno/anticuerpo y en ellas se visualiza un precipitado visible, cuando reacciona un (ag) soluble (precipitógeno) y su (ac) correspondiente (precipitina). Los precipitógenos pueden ser cualquier sustancia antigénica en suspensión coloidal, comoproteínas séricas, toxinas, extractos de bacterias, parásitos, hongos, etc.

Mecanismo de Reacción

Las reacciones de precipitación y aglutinación tienen un mismo mecanismo de reacción, y su diferencia depende de la naturaleza del Ag. En las reacciones de precipitación el Ag además de ser soluble, debe ser multivalente (es decir, debe contar con varias copias del mismo determinanteantigénico). Ello conlleva a la formación gradual de un entrecruzamiento o red entre los Acs divalentes y los determinantes antigénicos de Ags adyacentes, que al alcanzar ciertas dimensiones, el complejo formado precipita. La unión del precipitógeno y la precipitina ocurre rápidamente en segundos, pero la formación de los precipitados y por lo tanto, su visualización, puede demorar desde minutos, horas yhasta días.

Modalidades de las Reacciones de Precipitación

Las reacciones de precipitación se pueden realizar en: 1- Medio líquido y 2- Medio semisólido.

Medio Semisólido: Inmunodifusión

Las reacciones de inmunodifusión, son técnicas de precipitación que utilizan el agar con medio de soporte, en donde el Ag y/o el Ac van a difundir y en el sitio donde se encuentren en sus proporcionesóptimas, aparecerá una linea, un anillo o un arco de precipitación. Esta técnica fue introducida por Oudin en 1946, con su método de difusión simple en un tubo.

Agar: polisacárido derivado de ciertas algas, que viene en forma granulada y se disuelve en agua destilada o amortiguador (buffer) caliente. La solución al alcanzar la temperatura ambiente queda en estado semisólido

Lainmunodifusión se usa para el análisis cualitativo, semicuantitativo y cuantitativo de antígenos y anticuerpos en el suero y otros líquidos corporales. La interpretación del análisis es el desarrollo de una reacción de precipitación (la formación de un complejo antígeno- anticuerpo insoluble a partir de un antígeno y anticuerpo soluble).

Inmunodifusión Doble de Ouchterlony: Es una de las técnicas masutilizadas para evaluar en forma cualitativa o semicuantitativa la presencia de Ags o Acs en una muestra biológica. Se fundamenta en el principio de que el Ag y el Ac difunden a través del agar formando líneas de precipitación que representan complejos inmunes, los cuales pueden analizarse visualmente. Esta prueba permite relacionar varios Ags o Acs a través de 3 tipos de patrones: patrón de identidad,de no identidad y de identidad parcial.

Patrón de Identidad: Patrón caracterizado por la formación de dos líneas de precipitación que confluyen en un punto y significa que en 2 muestras biológicas existe la presencia del mismo anticuerpo específico para un determinado antígeno.

Patrón de No Identidad: Patrón caracterizado por la formación de 2 líneas de precipitación que se cruzan porcompleto y significa que en una muestra biológica existe la presencia de 2 anticuerpos diferentes, específicos para 2 antígenos.

Patrón de Identidad Parcial: Patrón caracterizado por la formación de 2 líneas de precipitación que no se suponen por completo, debido a que los antígenos comparten un determinante antigénico (Ags que reaccionan cruzadamente), con la consecuente formación de un espolón,debido a que una de las líneas de precipitación se proyecta en el agar.

Utilidad Clínica de la Inmunodifusión de Ouchterlony

Posibilidad de hacer diagnóstico y evaluar la evolución de enfermedades infecciosas producidas por bacterias, hongos, virus y parásitos.

Inmunodifusión Radial de Mancini: Se Fundamenta en el principio de que exista una relación cuantitativa entre la cantidad de Ag...