medios de cultivo

TSI Agar AGAR DE HIERRO Y TRIPLE AZÚCAR (TSI)
Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de glucosa, lactosa, sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico. 
Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son loshidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Por fermentación de azúcares,se producen ácidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol,el cual vira al color amarillo en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno el que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color negro.
Siembra
A partir de un cultivo puro, sembrar en TSI, picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del medio.
Esun medio empleado para la diferenciación e identificación de enterobacterias. Está formado por lactosa, sacarosa y glucosa, la lactosa y sacarosa están presentes en el medio en una concentración 10 veces mayor a la glucosa, también tiene sulfato ferroso para detectar la producción de H2S, el indicador vira a amarillo a un pH menor a 6.8.
El medio es sólido y se encuentra en pico de flauta con elobjeto de formar dos cámaras de reacción dentro del mismo tubo. La porción inclinada, expuesta en toda su superficie al oxígeno atmosférico es aerobia y la porción inferior está protegida del aire y es relativamente anaerobia. Este medio tiene tres fines: la identificación de la utilización de carbohidratos, la determinación de la producción de H2S y la producción de gas. Los organismos quefermentan únicamente a la glucosa dan una lectura alcalino/ácido, es decir, el pico se observa de color rojo y el fondo de amarillo, lo cual indica que se produjo la degradación de la glucosa en todo el medio pero al ser más baja la concentración de glucosa en el pico de flauta (0.1%) ha sido consumida por completo y el organismo empieza a utilizar a las peptonas que se encuentran en el medio paraobtener los nutrientes necesarios para su crecimiento. Sin embargo en la capa profunda se observa color amarillo debido a que los productos terminales ácidos son más estables. Algunas bacterias tienen la facultad de fermentar tanto a la lactosa como a la sacarosa dando una coloración amarilla en todo el tubo, es decir, tanto en el fondo como en el pico de flauta, esto debido a que estos carbohidratosse encuentran en una concentración 10 veces mayor que la glucosa (1%) y a las 24 horas aún no han sido consumidos por las bacterias.
En este medio también se pude observar la producción de gas que es anhídrido carbónico e hidrógeno. Las bacterias que producen gas se denominan aerógenas observándose burbujas en el medio y las que no producen gas se denominan anaerogénicas. Algunas bacteriastambién son capaces de producir H2S, la producción de H2S se lleva a cabo en dos etapas: En una primera etapa, la bacteria al fermentar al carbohidrato produce acidez la cual reacciona con el tiosulfato de sodio presente en el medio para dar H2S en forma de gas, el cual en una segunda etapa reacciona con los iones férricos para dar sulfuro ferroso que es un precipitado negro insoluble en el medio. Elprecipitado negro puede ocultar la condición ácida producida por la bacteria, por lo tanto si se produce H2S es indicativo de que existe una condición ácida aún cuando no se observe.
pH final 7.3 ± 0.2
AGAR DE HIERRO Y LISINA (LIA)
Es un medio muy útil para diferenciar a las enterobacterias, se basa en la descarboxilación de la lisina, formación de sulfuros, fermentación de glucosa y formación...