Ph En Bioquimica

I. INTRODUCCION

La concentración de Hidrogeniones (H+) en la célula tiene un poderoso efecto sobre las reacciones químicas que allí ocurren.
La expresión matemática del pH corresponde al logaritmo negativo de la concentración de Hidrogeniones expresada en normalidad:
pH = -log [H+]
El pH de una solución puede ser estimado en la práctica, mediante el uso de métodos colorimétricos.
Elindicador tan conocido de determinar el pH de una solución usando el papel indicador del pH, está incluido en los métodos colorimétricos.
El método colorimétrico, se basa en el empleo de los indicadores que son ácidos o bases débiles con capacidad de cambiar de color cuando están ionizados.

IH I- + H+
(COLOR A) (COLOR B)

Cuando el pH del medio coincide con el pK de indicador, el 50% de lasmoléculas están ionizadas y el otro 50% estarán sin ionizar. En esta situación el indicador tomará una coloración intermedia entre el color del indicador no ionizado y el color del indicador ionizado.
Se entiende que las proximidades del pK, el indicador tomará una serie de tonalidades, según predomine una u otra forma del indicador. En la tabla uno se señala las características de losindicadores más comunes usados.

Tabla Nº 1: INDICADORES (Tabla de Klark)

INDICADOR | pK | LÍMITES DE pH | Cambio de Color |
Azul de timol | 1.5 | 0.5 – 2.8 | Rojo – Amarillo |
Azul de bromofenol | 4.0 | 3.0 – 5.0 | Amarillo – Azul |
Verde de bromocresol | 4.7 | 3.7 – 5.7 | Amarillo – Azul |
Rojo de clorofenol | 6.0 | 5.0 – 7.0 | Amarillo – Rojo |
Azul de bromotimol | 7.0 | 6.0 – 8.0| Amarillo – Azul |
Rojo de fenol | 7.6 | 6.8 – 8.4 | Amarillo – Rojo |
Azul de timol | 8.9 | 7.9 – 9.9 | Amarillo – Azul |
Fenolftaleína | 9.2 | 8.3 – 10.0 | Incoloro – Rojo |

El fundamento de la determinación del pH por el método colorimétrico, es el de comparar el color que da la solución problema con el indicador, con el que rinden soluciones de pH conocido (solucionespatrón), con el mismo que el pH d la solución patrón.

El método más exacto para la determinación del pH de las soluciones es el método potenciométrico, que se basa en la medida del potencial eléctrico de ciertos electrodos, cuando son introducidos a la solución problema. Los electrodos más comúnmente usados son el de vidrio y el de hidrógeno. El aparato empleado se denomina potenciómetro y son deamplia utilización.
Las disoluciones Tampón o amortiguadoras de pH, mantienen el pH del medio constante, de forma que anque se les adiciones un ácido o una base fuerte el pH no variará.


II. OBJETIVOS

* Utilizar indicadores en la determinación del pH de una solución.
* Determinar el pH de las muestras biológicas.

III. MATERIALES

4.1 Materiales

* Pipetas
*Tubos de ensayo
* Papel indicador

4.2 Reactivos

* Muestras biológicas
* Indicadores de pH
* Acido Acetico glacial
* Amoniaco
* Muestras problema
* Acido acético
* Acetato de sodio

IV. PROCEDIMIENTO
Experimentos Nº 1
Determinación del pH de una solución de ácido Acético 0.05M
* Colocar 5 ml de solución de ácido acético 0.05M en cada uno de lostubos de ensayo.
* Luego agregar 2 gotas de un indicador diferente en cada tubo, agitar y observar el color que se obtiene.
Indicadores ácidos
Indicadores | Intervalo de pH | Ácido | “Color neutro” | Alcalino |
Anaranjado de metilo | 1,3,4,5 | Rojo | Anaranjado | Amarillo |
Verde de bromocresol | 3,4,6 | Amarillo | Verde | Azul |
Rojo de metilo | 4,6 | Rojo | Anaranjado | Amarillo |Experimento Nº 2
Determinación del pH de una solución de Hidróxido de amonio 0.05M
* Medir en una probeta graduada, bien limpia y seca 30 ml de solución de hidróxido de amonio 0.05M
* Proceder a colocar 5 ml de hidróxido de amonio es cada uno de los tubos de ensayo.
* Agregar 2 gotas de un indicador diferente en cada tubo y proceder como en el paso anterior del ácido acético....