Primero

Parcial 3 de biología celular
Tema: Sistema endomembranal

I. Cuando se va a sintetizar una proteína que tiene como destino final una secreción regulada, los ribosomas libres en el citoplasma comienzan su traducción y termina en el retículo endoplasmático rugoso (RER). Las moléculas que se encuentran de manera soluble o que están en la membrana del RER (Partícula de reconocimiento dela señal y su receptor), así como el mismo péptido señal son muy importantes para la translocación del péptido hacia el interior del RER. Se quiere investigar a cerca del papel del receptor de la Partícula de Reconocimiento de la señal, cuando se está traduciendo una proteína . Así que se diseña un experimento con células acinares de la parótida y en páncreas, la cual sintetizan α-amilasa, yque se detectan en los gránulos de secreción de estas células. Se reconstituyó su síntesis in vitro , en un sistema libre de células. El peso de la proteína madura pesa 55 KDa. Las condiciones a la cual se realizó este modelo experimental se describen a continuación:

a. No tiene receptor de la partícula de reconocimiento de la señal, ni bolsas de membrana para transporte (microsomas),ni la partícula de reconocimiento de la señal.

b. Con la partícula de reconocimiento de la señal, sin el receptor de la partícula de reconocimiento de la señal y sin bolsas de membrana para transporte (microsomas).
c. Con la partícula de reconocimiento de la señal. Con el receptor de la partícula de reconocimiento de la señal soluble, sin bolsas de membrana para transporte (microsomas).Preguntas: (conteste por detrás de la hoja y en orden)
1. Explique por qué la α-amilasa del experimento a y c tiene el m ismo peso.
2. Cómo se podría revertir la síntesis de la α-amilasa en el experimento b?
3. Qué pasaría si la síntesis de la α-amilasa ocurre en presencia de partícula de reconocimiento de la señal y de bolsas de membrana (microsomas) del RER?
4. Realice uncontrol para corroborar los resultados esperados en las condiciones de la pregunta 3.

II. La glicosilación de la mayoría de las proteínas en el RER, involucra una o más cadena de carbohidratos. Algunas etapas de este proceso ocurre en el RER y otras en los compartimentos del Golgi. Con el fin de saber en cuál organelo se adiciona un monosacárido en particular a las proteínas, se realizó elsiguiente experimento:
Se seleccionó un grupo de hámster y a cada uno se les inyectó manosa marcada con tritio y Galactosa marcada con tritio , se sacrificaron 10 minutos después de haberles aplicado la inyección. Se disectaron y se sacaron partes de intestino grueso y luego se procedió a experimentarlos con métodos autoradiográficos, obteniéndose los siguientes resultados:

Distribución detritio radioactivo en azúcares marcados en células caliciformes
Azúcar | Compartimentos del sistema endomembranal con marca de tritio |
| RER | Complejo de Golgi | Gránulos de secreción |
Manosa marcada con tritio | +++ | _ | _ |
Galactosa marcada con tritio | _ | +++ | _ |

Preguntas: (conteste por detrás de la hoja y en orden)
a. Interprete porqué después de que se inyectó manosamarcada con tritio, se observa la marca con tritio en el RER, mientras que la Galactosa marcada con tritio está en el complejo de Golgi.
b. Llene la siguiente tabla indicando una distribución hipotética de tritio después de 10, 20, 40 minutos después de la inyección de los azúcares radiactivos.

Distribución de tritio radioactivo en azúcares marcados en células caliciformes
Azúcar |Tiempo (min) | Compartimentos del sistema endomembranal con marca de tritio |
| | RER | Complejo de Golgi | Gránulos de secreción |
manosa marcada con tritio | 10 | | | |
manosa marcada con tritio | 20 | | | |
manosa marcada con tritio | 40 | | | |
Galactosa marcada con tritio | 10 | | | |
Galactosa marcada con tritio | 20 | | | |
Galactosa marcada con tritio |...