“Proteínas como electrolitos”

Universidad de Chile
Facultad de Ciencias
Departamento de Química
Carrera de Química Ambiental





Informe del Laboratorio Nº 1

“Proteínas como electrolitos”






Profesora: María Cecilia Rojas.
Alumnos:
Fecha de entrega:
26/04/2012

Introducción
Las proteínas son las macromoléculas más versátiles, para todos los sistemas vivos, además de tener funciones claveen prácticamente todos los procesos biológicos. Se conforman por una cadena lineal de monómeros llamados aminoácidos. Éstos, a su vez, se encuentran unidos vía enlaces peptídicos, quienes comprometen los grupos carboxilo (-COOH) y amino (-NH2) de residuos de aminoácidos adyacentes.

Las proteínas contienen una gran variedad de grupos funcionales, entre los cuales es posible encontrar alcoholes,tioles, ácidos carboxílicos y aminas. Producto de su gran tamaño, son capaces de sufrir dispersiones coloidales ante un disolvente apropiado, cuyas características las diferencian de moléculas de menor tamaño.

Gracias a la estructura antes descrita de las proteínas, es posible aseverar que éstas son capaces de actuar como amortiguadores de pH. La función del amortiguador consiste en evitar loscambios demasiado bruscos de pH, para una solución determinada. Todo esto es posible gracias a la naturaleza anfótera que presentan las proteínas (es decir, que se pueden comportar como ácido o como base). Este hecho se ve favorecido, además, porque las proteínas presentan una variedad muy amplia de pKa, con lo cual se incrementan los rangos y matices de ácido/base.

Las proteínas también seven definidas por su punto isoeléctrico, pH en el cual la carga neta del péptido corresponde a cero. Como consecuencia, si se le aplica a dicho péptido un campo magnético, éste no presentará ninguna especie de desplazamiento. Esto también juega un papel importante dentro de la solubilidad de la proteína, ya que entre menor sea la carga total, menor será su solubilidad en agua. De esto, se puedeconcluir que cada proteína posee un pH óptimo, tanto en términos de solvatación como de catálisis, considerando también que la solubilidad está estrechamente relacionada con los cambios de temperatura.

El método que se empleará en este trabajo práctico, para determinar el punto isoeléctrico de una proteína en específico, consiste en someter a dicha proteína bajo distintos niveles de pH. Con esto,se pretende observar su solubilidad y a partir de ésta, hacer las aproximaciones correspondientes para estimar un punto isoeléctrico coherente.















Datos obtenidos y resultados

Experimento 1a. Amortiguación de pH por proteínas.

El método consistió en titular con HCl 0,01 N:
-1 mL de suero sanguíneo, el cual se encontraba diluido en 9 mL de NaCl 0,01 M.
-1 mL desuero desproteinizado, diluido también en 9 mL de NaCl 0,01 M.
-10 mL de NaCl 0,01 M.

El suero sanguíneo se desproteinizó calentando a baño María 1 mL de éste por un lapso aproximado de 5 minutos. Acto seguido, se le agregó 9 mL de NaCl 0,01 M, mientras se agitaba levemente. De todo esto, se formó un precipitado blanco en el fondo del tubo de ensayo. Finalmente, se retiró el sobrenadante con una pipeta Pasteur para eventualmente llevar a cabo la titulación.
Las soluciones resultantes eran incoloras. Por medio del indicador, que correspondía a rojo de metilo, se tornaron amarillentas. Cuando se tituló cada solución con HCl 0,01 N, el color de estas soluciones oscilaba entre un rosa pálido y un fucsia intenso.
Es sabido que la normalidad está dada por la siguiente relación:Normalidad = Equivalentes/Litro de solución.
Por lo tanto, es posible calcular los equivalentes, si se despeja la ecuación anterior.

Equivalente = Litros de solución x Normalidad. (1)

A partir de esta fórmula, es posible elaborar la siguiente tabla de resultados:

Tabla 1: Equivalentes de ácido utilizado en...