Proteina C Reactiva

MATERIAL Y EQUIPO NECESARIO NO PROPORCIONADO - Cronómetro - Lámpara de luz intensa

OBTENCIÓN DE LA MUESTRA No se requiere de una preparación especial del paciente antes de la toma de muestra. 1. Obtener 3.0 mL de sangre por punción venosa.

PROTEÍNA C REACTIVA
AGENTE DE DIAGNOSTICO

2. Centrifugar y separar el suero.

Equipo para investigar por aglutinación de partículas de látex.INTRODUCCIÓN Tillet y Francis concluyeron en 1930 que la reacción que se origina en el suero de pacientes que sufren de enfermedades inflamatorias precipita con un extracto de pneumococo no proteico llamado polisacárido C. La proteína que causa este tipo de reacción fue llamada Proteína “C” Reactiva. Como un fenómeno no específico, el incremento en la concentración de Proteína C Reactiva se puedepresentar en cualquier proceso inflamatorio agudo (ya sea infeccioso o no infeccioso). La concentración de Proteína C Reactiva generalmente se encuentra por debajo de 6 mg/L en el suero de adultos sanos y en enfermedades inflamatorias estos valores frecuentemente se incrementan en un lapso de 4 a 8 horas después de presentarse un evento agudo alcanzando niveles aproximadamente de 20 a 500 mg/L.Varios métodos de inmunoprecipitación se han desarrollado para la detección de Proteína C Reactiva. El principio del procedimiento presentado involucra una reacción inmunológica entre la Proteína C Reactiva (como antígeno) y el anticuerpo correspondiente adsorbido a las partículas de látex (látex sensibilizado con anti-Proteína “C” Reactiva). PRESENTACIÓN Catálogo Núm. 102: Equipo para 50 pruebasREACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADO - Antisuero adsorbido a partículas de látex. (látex antiPCR) - Suero Control Positivo - Suero Control Negativo - Diluyente Glicina Salina, concentrado, pH 8.2 - Placa de reacción - Pipetas desechables (únicamente para presentaciones de 40 y 100 pruebas) ESTABILIDAD Y ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO El látex anti-PCR así como los controles y el diluyente concentrado sonestables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando se almacenan a 2-8°C). las

Preparación del Diluyente Glicina Salina Concentrado: El frasco de Diluyente Glicina Salina Concentrado se afora con agua destilada al volumen suficiente según corresponda la presentación. Ejemplo: - 50 mL (para 50 pruebas) - 100 mL (para 100 pruebas) - 40 mL (para 40 pruebas), etcétera
MÉTODOCUALITATIVO

NOTA: El látex Anti-PCR debe estar a temperatura ambiente antes de ser utilizado.
1. Colocar en una gradilla un tubo de 13 x 100 mm. 2. Agregar 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado pH 8.2) diluido. 3. Añadir 0.05 mL del suero problema. 4. Después de haber agregado el suero problema, la dilución obtenida será 1:20 y estará lista para su uso. 5. En un anillo de laplaca depositar 0.05 mL del suero diluido. 6. En otro anillo depositar una gota del frasco No. 2 (suero control positivo). 7. En un tercer anillo depositar una gota del frasco No. 3 (suero control negativo). 8. Añadir a cada uno de los 3 anillos una gota del frasco No. 1 (Látex anti-Proteína «C» Reactiva) previamente resuspendido. 9. Mezclar manualmente la placa de reacción durante 2 minutos. 10.Realizar la lectura del resultado en este momento bajo una fuente de luz directa. Interpretación

Resultado Positivo Presencia de agregados macroscópicos (aglutinación comparable al control positivo). Resultado Negativo Ausencia de agregados macroscópicos (sin aglutinación, comparable al control negativo). La no aglutinación o una ligera aparición de granulocidad que no exceda a la observada enel control negativo indican un resultado negativo.

MÉTODO SEMICUANTITATIVO 1. Seleccionar los sueros positivos obtenidos en la prueba cualitativa. 2. Colocar en una gradilla 5 tubos de 12 x 75 mm y numerarlos. 3. Depositar al tubo No. 1, 0.95 mL del frasco No. 4 (Diluyente glicina-salina concentrado, pH 8.2) diluido. 4. Depositar del tubo No. 2 al 5, 0.5 mL del frasco No. 4 (Diluyente...