proteinograma

UNIVERSIDAD CATÓLICA DE CUENCA
FACULTAD DE MEDICINA, ENFERMERÍA Y
CIENCIAS DE LA SALUD.

PROTEINOGRAMA
Por: Felipe Córdova.
Cátedra: Laboratorio Clínico.
Catedrática: Dra. Alicia Bustos.
Curso: Quinto ciclo A.

ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS

ESTRUCTURA DE LAS
PROTEINAS
Cadena continua
de átomos de C y
N

Unidos mediante
enlaces
peptídicos entre
aminoácidos
adyacentes

ESTRUCTURA PRIMARIASecuencia lineal de los aminoácidos

- Determina la identidad de una
proteína
- Cuál es su estructura
molecular
- Qué funciones puede realizar
- Cómo puede unirse a otras
moléculas

ESTRUCTURA SECUNDARIA
Hélice alfa
• La cadena
forma una
hélice regular

Hojas plegadas
B

• La cadena
forma una
estructura
plana en la
que las
cadenas de
aminoácidos
se sitúan en
direcciones
opuestas

En giro
• La cadenapolipeptídica se
invierte sobre si
misma

ESTRUCTURA
TERCIARIA

ESTRUCTURA
CUATERNARIA
- Proteínas individuales

- Aparición de
plegamientos.
- Configuración
tridimensional.

- Resulta la combinación de 2 o
mas proteínas.
- Ejemplo: la molécula de la
hemoglobina, compuesta por 4
cadenas polipeptídicas.

TÉCNICAS DE SEPARACIÓN
PROTEICA

ELECTROFORESIS
Es un método de separaciónde proteínas mediante la
aplicación de un campo eléctrico

Este estudio se basa en la propiedad de
las proteínas para moverse según su
peso molecular y su carga eléctrica, al
colocar una muestra de suero del
paciente en una matriz (Gel de Agarosa
o Acetato de Celulosa) y aplicar voltaje

1. ELECTROFORESIS DE ZONA
Cuando una mezcla de moléculas ionizadas son
colocadas en un campo eléctrico, estas
experimentan unafuerza de atracción hacia el
polo que posee carga opuesta, así, las
moléculas cargadas positivamente se
desplazaran hacia el cátodo (el polo negativo) y
aquellas cargadas positivamente se desplazaran
hacia el ánodo (el polo positivo).
- Su carga neta depende del pH del medio.
- La muestra cuyas proteínas se quieren separar
se inserta en un medio de soporte y se aplica
una diferencia de potencialdurante un tiempo
determinado para separar las proteínas.
- Cada proteína migrará más o menos en función
de su carga

2. ISOELECTROENFOQUE

-

 En lugar de separar las proteínas en función de su
carga a un pH dado, se separan en función de su
punto isoeléctrico (pI).

-

El pI es el pH en el que la carga neta de la proteína
es nula, y depende de la composición aminoacídica
de la proteína.

-

Cadaproteína migrará hasta alcanzar su pI, punto
en el cual precipitará al acumularse

3. SEPARACIÓN POR TAMÁÑO
-

 Permite separar proteínas y ácidos nucleicos.

-

En el caso de las proteínas, deben ser
tratadas con SDS (sodio dodecil sulfato) para
que su carga sea negativa y todas migren
hacia el ánodo.

-

La separación se hace en medios de soporte
en el que se ha creado un tamiz molecular
(matriz).-

Hace que las proteínas más pequeñas corran
más que las más grandes.

PRECIPITACIÓN
Se idearon para separar la
albumina y las globulinas en
dos o mas fracciones, que
posteriormente pudieran
medirse para valorar su
contenido proteico.
La disminución de albumina y
elevación de globulinas tiende a
ocurrir simultáneamente en la
enfermedad, conduciendo de
este modo a cambios
exagerados en laproporción
A/G.

La albumina puede bajar
debido a cualquier
disminución en su síntesis o a
una perdida incrementada

Los métodos de precipitación
no son tan exactos como la
electroforesis zonal, dado que
ciertas α-globulinas pueden
no precipitar, originando, en
consecuencia, unas
sobreestimación de la
fracción de albumina

SEPARACIONES EN COLUMNA
Las moléculas muy grandes tienden
a fluir a través delos intersticios de
la columna sin penetrar en las
partículas y emergen primero del
fondo de la columna.

Las moléculas ligeramente
menores penetran en los
poros mas grandes antes de
ser arrastradas y así quedan
ligeramente retardadas a su
paso a través de la columna,
las moléculas proteicas
pequeñas penetran en poros
de menor tamaño y son
retenidos durante mas
tiempo.

CROMATOGRAFIA DE...