PRUEBA
Para la determinación de la DL50 el primer paso es el conteo de las larvas o nauplios muertos en cada extracto y cada blanco, se corrigen las mortalidades mediante la fórmula de Abbott y paralelamente se utiliza otra corrección que se basa en el porcentaje de supervivencia de los individuos, esta corrección es utilizada en algunos procedimientos encontrados. Lasfórmulas de estas correcciones son las siguientes:
(Formula de Abbott) (Eq. 1)
Dónde:
M = Mortalidad.
me = mortalidad en el extracto.
mb = mortalidad en el blanco.
(Eq. 2) (Eq. 3)
r = Nauplios muertos en el extracto.
r' = Nauplios muertos en el blanco.
n = Número de individuos.
Como el número de individuos es constante (10 en este caso):
(Eq. 4)
La otra corrección utilizada es lasiguiente:
(Eq. 5)
Dónde:
S = supervivencia
s' = Nauplios vivos en el blanco
Mortalidad = 1 - Supervivencia (Eq. 6)
Igualando las dos ecuaciones anteriores:
(Eq. 7)
A continuación se determina la DL50 mediante el método gráfico de Probit, hallando la mejor línea Ldp (Línea dosis-Probit), este método puede presentar variaciones en cuanto a la forma de determinar la ecuación de la línea Ldp,algunos autores encuentran la pendiente de la gráfica (B), obteniendo el inverso de la desviación estándar de las dosis metamétricas (1/q ), con este valor y el LogDL50 hallado en la gráfica para un Probit de 5, encuentran el valor del termino independiente (A). Este método es muy aproximado y parte del precepto de que se puede encontrar la ecuación de la gráfica con la pendiente esperada (con ladesviación estándar del termino independiente) y el intercepto hallado en X (Log10DL50) para determinado valor de Y (5 en este caso). Otros autores determinan la ecuación de la gráfica Ldp por el método de los mínimos cuadrados. Para verificar la linealidad se realiza una prueba mediante el estadístico de prueba t de Student bilateral (de dos colas) y n-2 grados de libertad, utilizando el valor delfactor de correlación lineal (rc), donde la hipótesis nula es que no existe correlación entre Probit y el Log10 dosis . Para ello se utiliza la siguiente ecuación:
(Eq. 8)
t de Student para un nivel de confianza del 95% y n-2 grados de libertad
Para probar la adecuación de la gráfica se realiza el test de bondad de ajuste mediante el estadístico Ji - cuadrado (c 2), en este caso lahipótesis nula es que la línea Ldp es un modelo adecuado de los datos. Para el cálculo del c 2 se utiliza la mortalidad esperada de las larvas (P), la cual a su vez se halla con los Probit esperados los cuales se hallan con la ecuación de la gráfica Ldp. La ecuación es la siguiente:
c 2 = S (r - n.P)2 / n.P.(1-P) (Eq. 9)
c 2 para un nivel de confianza del 95% y n-2 grados de libertad
El último pasodel método gráfico consiste en establecer los límites de confianza para la DL50, para ello se hace uso de los coeficientes de ponderación (W) para cada Probit, los cuales son hallados en tablas. Las ecuaciones necesarias son las siguientes:
(Eq. 10)
Donde:
(Eq. 11)
(Eq. 12)
El intervalo de confianza es entonces representado como:
LogDL50 ± 1,96. SLogDL50
(Eq. 13)
El valor de1,96 corresponde a un nivel del 95% de confianza para una distribución normal. Una vez realizado el método gráfico, se procede a emplear el método de la máxima verosimilitud, el cual consiste en la suposición de normalidad de la población estudiada, con base en esto se pueden plantear una serie de funciones que denominan los valores de P (Probit) y W (coeficiente de ponderación), con los cuales sepueden hallar los estimativos más próximos para a y b (intercepto en las ordenadas y pendiente), denominados A y B respectivamente, en una línea recta.
ANÁLISIS DE RESULTADOS
Es considerable el efecto de corrección de la mortalidad. En las figuras 1, 2 y 3 puede observarse la sensibilidad de la fórmula de Abbott a los efectos en el blanco, cuando la mortalidad en las dosis es muy pequeña,...
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