tecnico laboratorio clinico

TRABAJO PRÁCTICO Nº 4
FISIOLOGIA DE LA HEMOSTASIA
ESTUDIO DE LOS PROCESOS FISIOLÓGICOS PUESTOS EN JUEGO DURANTE LA HEMOSTASIA
PRIMARIA Y SECUNDARIA

1. OBJETIVOS
Con los conocimientos adquiridos en la clase teórica:
1. a. OBJETIVOS GENERALES


Conocer los mecanismos fisiológicos involucrados en la hemostasia.



Comprender el rol de las plaquetas, el endotelio y los factores decoagulación en la regulación del
proceso hemostático.

1. b. OBJETIVOS ESPECÍFICOS


Comprender la importancia de la Hemostasia primaria en el mantenimiento de la integridad del
organismo.



Relacionar la estructura de las plaquetas con su función dentro de los mecanismos hemostáticos.



Comprender el concepto de hemostasia Secundaria y su papel en el equilibrio homeostático delorganismo.



Conocer los Factores de la coagulación, su lugar de síntesis y función.



Integrar los procesos involucrados en el mecanismo de la coagulación: formación del coágulo y
fibrinólisis.



Relacionar la Teoría de la Cascada con los eventos observados “in Vitro” y los que ocurren “in Vivo”
explicados por el nuevo modelo basado en superficies celulares.

2.CONOCIMIENTOS TEÓRICOS NECESARIOS


Hemostasia primaria: Plaquetas. Estructura. Función.



Hemostasia Secundaria: Factores de la coagulación. Mecanismo de la coagulación. Teoría de la
Cascada. Nuevo Modelo basado en superficies celulares.

3. DESARROLLO DEL TRABAJO PRÁCTICO
3.a. Fundamento
El término Hemostasia se refiere al conjunto de interacciones entre los componentes de la sangre y los dela
pared vascular, responsables de impedir la fuga de la sangre de dicho compartimiento. El proceso
hemostático a menudo es esquematizado en cinco fenómenos consecutivos que pueden superponerse:
vasoconstricción localizada, adhesión de las plaquetas al subendotelio, formación del tapón plaquetario,
reforzamiento de éste a través del depósito de fibrina y finalmente degradación del materialdepositado a
través de la fibrinólisis.

Fisiología de la Hemostasia

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3.b. Recuento de plaquetas:
El recuento plaquetario en sangre entera refleja, en individuos normales, el equilibrio que existe entre la
producción en médula ósea y las plaquetas en circulación periférica.
Debe trabajarse con material plástico o vidrio siliconado, ya que las plaquetas tienden a adherirse y
agregarsesobre cualquier superficie que no tenga calidad de endotelio normal.
Es conveniente observar al microscopio un frotis de sangre periférica, independientemente del método de
recuento utilizado, donde se evaluará, número distribución, forma y tamaño plaquetario.
Los métodos de recuento pueden ser manuales, semiautomáticos y automáticos.
Materiales y método:


Sangre entera anticoagulada conEDTA disódico o dipotásico al 10% (p/v).



Oxalato de amonio 1%. Se guarda en heladera. Conviene preparar y fraccionar en alícuotas. Se
filtra en el momento de usar.



Micropipetas calibradas o automáticas.



Cámara de Neubauer.



Cámara Húmeda (Caja de papel con filtro humedecido)



Microscopio de contraste de fase o normal.

La muestra de sangre venosaanticoagulada con Edta, se homogeiniza y se toma una muestra con
micropipeta calibrada o semiautomática, 20 µl en 1,80 ml de solución de Oxalato de amonio 1%. (dil
1/100)
Se homogeniza suavemente y se deja reposar 10 minutos para favorecer la hemólisis de los Glóbulos
rojos. Pasado ese tiempo, se agita y se carga la cámara de Neubauer y se realiza el recuento como si
fueran Glóbulos rojos (ver TP Nº 2)El resultado obtenido se multiplica por 1000 ya que la dilución que se realiza es de 1/100 y el volumen
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contado es 0,1 mm . El resultado se expresa por mm

3

Valores de Referencia: 150.000 – 400.000 /mm

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3.c. Tiempo de Sangría
Cuando se produce una injuria tisular

quedan expuestos

los componentes del subendotelio

(fundamentalmente colágeno tipo IV y V donde las...