Tincion de Gram
Páginas: 9 (2156 palabras)
Publicado: 31 de octubre de 2013
Tinción de Gram: Leche descompuesta
Puerto Montt-Chile
2013
Índice
Contenido Nº pág.
Introducción……………………………………………………………………... 3
Revisión bibliográfica………………………………………………………….. ..4
Glosario…………………………………………………………………………….5
Diagrama de flujo…….………………………………………………………......14Dibujo……………………………………………...……………………….……...16
Conclusiones……………………………………………………………………..18
Referencias Bibliográficas……………………………………………................19
Introducción
En este informe presentaremos la “tinción de Gram” realizada en el laboratorio el día 06 de septiembre de 2013, en el cual utilizamos leche cruda que se encontraba 3 meses aproximadamente sinrefrigeración a la que se le añadió sobre un porta objetos 2 a 3 gotas del colorante primario violeta aplicando calor durante unos minutos con un mechero para secar completamente esta preparación para luego añadir agua destilada, después agregamos lugol, transcurrido el tiempo lavamos nuevamente con agua destilada y añadimos alcohol a 95% y volvemos a lavar con agua destilada por últimoagregamos el colorante secundario safranina y el aceite de inmersión para luego observar en el microscopio.
Con estos pasos lograremos observar las bacterias y la cantidad de peptidoglucano que se encuentran en las paredes celulares de estas y a la vez ver si corresponde a una tinción Gram positiva o Gram negativa.
Revisión bibliográfica
La tinción Gram fuedesarrollada por Christian Gram en 1884, a pesar del tiempo transcurrido es una de las tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, esta es capaz de clasificar los cultivos bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas.
La diferenciación entre las bacterias Gram positivas y negativas se establece en la naturaleza y características de la pared celular bacteriana.
Lasbacterias Gram positivas poseen una gruesa capa de peptidoglicano, las cuales a su vez poseen moléculas de ácido teitoico. El ácido teitoico reacciona con el cristal violeta colorante y yodo (primario que se utilizara en la realización de este práctico). Las capas de peptidoglicano son capaces de retener al complejo colorante-mordiente cristal violeta-yodo dejando así una coloración violeta en lascélulas. Durante la decoloración con alcohol acetona se provoca una deshidratación de esta gruesa pared y se reduce la porosidad, atrapando entonces al complejo en el interior de la célula.
A diferencia de las bacterias Gram positivas, las bacterias Gram negativas, poseen una delgada capa de peptidoglicano no puede impedir la salida del complejo colorante-mordiente y es entonces fácilmenteteñida por el colorante de contraste en el practico a realizar se utilizara la safranina.
Luego de haber realizado la tinción diferencial, se deberá observar la muestra tratada en un microscopio, para poder ver si corresponde a una bacteria Gram positiva o Gram negativa.
Glosario
Colorante
Los colorantes utilizados en Microbiología son compuestos orgánicos que contienen gruposcromóforos y auxocromos unidos a anillos aromáticos. La presencia de grupos cromóforos en una molécula (grupos azo, nitro, etc.) no es suficiente para que ésta actúe como colorante, esto es que se fije a las estructuras a colorear. Para ser colorante debe poseer grupos que sean capaces de disociarse llamados auxocromos.La distinción entre colorantes ácidos y básicos depende de la carga de la parte de lamolécula responsable del color. Si es negativa se trata de un colorante ácido y si es positiva se trata de un colorante básico. Esta diferencia es importante debido a que, según sean ácidos o básicos, los colorantes tendrán afinidad por diferentes zonas de la anatomía celular.
Algunos colorantes utilizados comúnmente en Microbiología son fucsina básica, cristal violeta, safranina, azul de...
Tinción de Gram: Leche descompuesta
Puerto Montt-Chile
2013
Índice
Contenido Nº pág.
Introducción……………………………………………………………………... 3
Revisión bibliográfica………………………………………………………….. ..4
Glosario…………………………………………………………………………….5
Diagrama de flujo…….………………………………………………………......14Dibujo……………………………………………...……………………….……...16
Conclusiones……………………………………………………………………..18
Referencias Bibliográficas……………………………………………................19
Introducción
En este informe presentaremos la “tinción de Gram” realizada en el laboratorio el día 06 de septiembre de 2013, en el cual utilizamos leche cruda que se encontraba 3 meses aproximadamente sinrefrigeración a la que se le añadió sobre un porta objetos 2 a 3 gotas del colorante primario violeta aplicando calor durante unos minutos con un mechero para secar completamente esta preparación para luego añadir agua destilada, después agregamos lugol, transcurrido el tiempo lavamos nuevamente con agua destilada y añadimos alcohol a 95% y volvemos a lavar con agua destilada por últimoagregamos el colorante secundario safranina y el aceite de inmersión para luego observar en el microscopio.
Con estos pasos lograremos observar las bacterias y la cantidad de peptidoglucano que se encuentran en las paredes celulares de estas y a la vez ver si corresponde a una tinción Gram positiva o Gram negativa.
Revisión bibliográfica
La tinción Gram fuedesarrollada por Christian Gram en 1884, a pesar del tiempo transcurrido es una de las tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, esta es capaz de clasificar los cultivos bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas.
La diferenciación entre las bacterias Gram positivas y negativas se establece en la naturaleza y características de la pared celular bacteriana.
Lasbacterias Gram positivas poseen una gruesa capa de peptidoglicano, las cuales a su vez poseen moléculas de ácido teitoico. El ácido teitoico reacciona con el cristal violeta colorante y yodo (primario que se utilizara en la realización de este práctico). Las capas de peptidoglicano son capaces de retener al complejo colorante-mordiente cristal violeta-yodo dejando así una coloración violeta en lascélulas. Durante la decoloración con alcohol acetona se provoca una deshidratación de esta gruesa pared y se reduce la porosidad, atrapando entonces al complejo en el interior de la célula.
A diferencia de las bacterias Gram positivas, las bacterias Gram negativas, poseen una delgada capa de peptidoglicano no puede impedir la salida del complejo colorante-mordiente y es entonces fácilmenteteñida por el colorante de contraste en el practico a realizar se utilizara la safranina.
Luego de haber realizado la tinción diferencial, se deberá observar la muestra tratada en un microscopio, para poder ver si corresponde a una bacteria Gram positiva o Gram negativa.
Glosario
Colorante
Los colorantes utilizados en Microbiología son compuestos orgánicos que contienen gruposcromóforos y auxocromos unidos a anillos aromáticos. La presencia de grupos cromóforos en una molécula (grupos azo, nitro, etc.) no es suficiente para que ésta actúe como colorante, esto es que se fije a las estructuras a colorear. Para ser colorante debe poseer grupos que sean capaces de disociarse llamados auxocromos.La distinción entre colorantes ácidos y básicos depende de la carga de la parte de lamolécula responsable del color. Si es negativa se trata de un colorante ácido y si es positiva se trata de un colorante básico. Esta diferencia es importante debido a que, según sean ácidos o básicos, los colorantes tendrán afinidad por diferentes zonas de la anatomía celular.
Algunos colorantes utilizados comúnmente en Microbiología son fucsina básica, cristal violeta, safranina, azul de...
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