Unidad II Cromatografia

18/11/2012

Temas del Contenido
Química Analítica II
UNIDAD II
“Separaciones

Cromatográficas”

Cromatografía de Gases
Cromatografía de Líquidos de
Alta Resolución

M. en C. Martha Hernández Labra
Facultad de Farmacia
UAEM

Cromatografía
de Gases
“Es la técnica a elegir para la
separación de compuestos orgánicos
e inorgánicos térmicamente estables
y volátiles”

Cromatografía de GasesCromatografía de gas-líquido
• El Fundamento es la separación del
analito entre una fase móvil gaseosa y
una fase líquida inmovilizada sobre la
superficie de un empaque sólido inerte
o en las paredes de una columna o
capilar.

Cromatógrafo de Gases

• La muestra se volatiliza y se inyecta en la
cabeza de una columna cromatográfica.
• La elución se produce por el flujo de una
fase móvil de un gas inerte. Lafase móvil
no interacciona con el analito, su única
función es la de transportar el analito a
través de la columna.
• Existen dos tipos:
Cromatografía de Gas-Líquido
Cromatografía de Gas-Sólido

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• Un cromatógrafo de gases consiste en el acoplamiento
de varios módulos básicos ensamblados para:
– Proporcionar un flujo constante de gas portador
– Permitir la introducción de vapores dela muestra
en la corriente de gas que fluye
– Contener la longitud apropiada de fase
estacionaria
– Mantener la columna a la temperatura apropiada
(o la secuencia del programa de temperatura)
– Detectar los componentes de la muestra a medida
que eluyen de la columna
– Proveer una señal legible proporcional en
magnitud a la cantidad de cada coomponente

Cromatógrafo de Gases

Gas de acarreo
• El gasde acarreo o portador o fase móvil, es el
que transporta a los compuestos a través de la
columna.

Gas Portador o de Acarreo

• Debe ser químicamente inerte, puro (>99%),
seco y se aconseja colocar un filtro de carbón
activo y una trampa para humedad antes de la
entrada del gas al instrumento.
• El tipo de gas acarreador depende de la
velocidad requerida para el análisis y el tipo de
detector aemplear. Los más utilizados son
helio, nitrógeno, hidrógeno o una mezcla argón
con 5 % de metano.

• Con ciertos tipos de columnas y detectores, se
requiere el uso de un gas de complemento en el
detector (“make-up”).
• El “make-up”, es un gas de arrastre adicionado al
efluente de la columna antes de que pase al
detector.

Inyectores

• El sistema de gas portador contiene a menudo un
tamiz molecularpara eliminar el agua u otras
impurezas.
• Los caudales utilizados en las columnas empacadas
oscila entre 25 y 90 mL/min y de 1 a 2 mL/min en
las capilares.

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Inyectores

Cámara de
Vaporización
Instantánea

La cámara de muestra normalmente está a unos 50º C por
encima del punto de ebullición del componente menos
volátil de la muestra

El modo estándar es la inyección directa,
lamuestra es inyectada con una jeringa a
través de un septum de goma a un
alineador de vidrio donde es vaporizada
y transportada por el gas al interior de la
columna.
El bloque de inyección, se mantiene a una
temperatura tal que permita convertir
prácticamente de forma instantánea la
muestra líquida en un tapón de vapor.
Existen jeringas especiales para muestras
gaseosas. También se puede emplear unlazo o bucle para incoporar las muestras
gaseosas al flujo de gas portador

El modo de separación más extendido
en la actualidad se basa en el empleo
de columnas capilares. Estas columnas
requieren muy pequeños volúmenes de
muestra.
Esto se logra empleando un inyector
que incorpora un divisor de flujo
(split). Normalmente se introduce en la
columna un 1%

Columnas

Cuando las sustancias a separarse
encuentran
a
muy
bajas
concentraciones se realiza inyección sin
divisor (splitless)

Es donde ocurre la separación y es el
“corazón” de un cromatógrafo.
• Se utilizan dos tipos generales de
columnas: las rellenas o empacadas, y las
abiertas o capilares.
• Varían de menos de 2m hasta 50 m o
más.
• Están construidas con acero inoxidable,
vidrio, sílice fundido, aluminio ó
teflón.

Columnas...