1 Fund teorico practicos inmunoh serie roja
Fundación Hemocentro Buenos Aires
Noviembre 2011
01/11/2011
Dr. Silvio Rosell
El estudio de los antígenos y anticuerpos
presentes en la sangre, tanto en
condiciones normales como patológicas
Es el estudio de los marcadores antigénicos
propios de los glóbulos rojos, plaquetas y
leucocitos, como así también de las respuestas
inmunológicas que estosprovocan
Sólo los antígenos de los sistemas RH, KELL
MNS y LW, son específicos de la línea
eritroide
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Dr. Silvio Rosell
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Dr. Silvio Rosell
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Dr. Silvio Rosell
La aglutinación es la agregación,
mediada por anticuerpos, de las
partículas que expresan antígenos
de superficie.
Tiene dos etapas
1.
2.
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Sensibilización
Formación de puentes entre lascélulas sensibilizadas.
Dr. Silvio Rosell
La hemólisis es la destrucción de los glóbulos
rojos, con liberación de la hemoglobina
intracelular
La hemólisis no ocurre si los antígenos interactúan
con los anticuerpos en sueros sin complemento o
plasma con anticoagulante
La hemólisis constituye un resultado positivo
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Dr. Silvio Rosell
Algunos antígenos de gruposanguíneo están
presentes en formas solubles en saliva, orina y
plasma
Estas sustancias pueden utilizarse para inhibir la
reactividad de los anticuerpos correspondientes
La inhibición también permite neutralizar
anticuerpos que enmascaran la presencia de otros
no neutralizables
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Dr. Silvio Rosell
El grado de ionización de
las moléculas
Depende
fundamentalmente del pH
del medioConstante de equilibrio
(afinidad de los
anticuerpos)
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Deriva de las tasas relativas
de asociación y disociación
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La inhibición de la aglutinación por exceso de
anticuerpos es sumamente infrecuente
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Dr. Silvio Rosell
La centrifugación promueve el acercamiento
físico de las células
La prueba antiglobulínica indirecta emplea
suero antiglobulínicoOtros métodos actúan:
reduciendo la carga negativa de las moléculas
superficiales
disminuyendo la capa de hidratación que rodea a las
células
introduciendo macro moléculas con carga positiva
que las agregan
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Albúmina Humana
LISS (Low ionic saline solution)
PEG (Polietilenglicol)
POLYBRENE (BHDM)
Técnicas con enzimas proteolíticas
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Disminuye el potencial Z, favoreciendo la 2º fase
de la aglutinación.
En concentraciones de 30% o >favorece la
aparición de rouleaux
En la PCI no aumenta la sensibilidad de la prueba
Por falta de ventajas objetivas está en desuso
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Ante estos polímeros los GR normales exhiben
agregación espontánea, que puede dispersarse con
salesneutras como el citrato de sodio
El BHDM es un polícatión de amonio cuaternario
que neutraliza las cargas negativas de los GR.
Favorecen la aglutinación por Ig G
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Dr. Silvio Rosell
El Polybrene se añade a los GR incubados con
anticuerpos a baja potencia iónica y bajo pH
Si se adiciona citrato de sodio, se restablece la
carga del GR
Si el aglutinado se disocia
Si elaglutinado persiste
prueba negativa
prueba positiva (aglutinación irreversible a los GR
sensibilizados con Acs)
Tiene sensibilidad disminuida en la detección de
anticuerpos del sistema Kell
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Dr. Silvio Rosell
El PEG es un polímero lineal hidrosoluble que se
usa como aditivo para incrementar la captación de
anticuerpos
Su acción principal es eliminar el agua
intercelularfavoreciendo el acercamiento de los
GR
No debe centrifugarse el PEG con el suero y GR
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Se lavan las células con solución salina y luego se
efectúa la prueba antiglobulínica
Dr. Silvio Rosell
El reactivo AGH de elección en las
pruebas con PEG suele ser el anti-IgG
evita las reacciones falsas positivas con
algunos agentes poliespecíficos
Precipitados podrían interpretarse...
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