Add Friends Pics To Your Moments

DIFERENCIACIÓN BIOQUÍMICA DE BACTERIAS GRAM POSITIVAS

 OBJETIVOS▪ Reconocer las características morfológicas y en los cultivos de las bacterias Grampositivas▪ Identificar bioquímicamente las diferentes bacterias Gram positivas deimportancia clínica.
INTRODUCCIÓN
Existen una gran variedad de bacterias Gram positivas de importancia clínica conforma de cocos como Staphylococcus aureus,especies de Streptococcus ,principalmente S. pneumoniae y cocos anaerobios: Peptostreptococcus
Entre los bacilos Gram positivos patógenos más comunes tenemos
Bacillusanthracis, Clostridium, Gardnerella, Listeria , Corynebacterium.
 Todas esta bacterias se encuentran causando procesos infecciosos en los sereshumanos y en algunos casos estas se encuentran colonizando alguna parte delcuerpo junto conbacterias de la flora normal. Por eso se hace necesario para suaislamiento e identificación realizar toma de muestras y procesamiento bacteriológicos correctos.Dentro de los Gram positivos, los cocos y en especial las especies de Streptococcus y los Staphylococcus son los más fáciles de aislar e identificar mediante observación de hemólisis, pruebas bioquímicas o diferencialesespecíficas como laprueba de catalasa para diferenciar Staphylococcus de Streptococcus, la prueba de coagulasa para diferenciar Staphylococcus patógenos de los no patógenos, la reacción de Quellung para distinguir neumococos etc.

METODOLOGÍA
Pruebas bioquímicas para Staphylococcus y Streptococcus
▪ Observar el tipo de hemólisis que presentan las placas de agar Sangre▪ Realizar la prueba de catalasa con una coloniade la placa de agar Sangre y conunade Manitol salado.▪ Para la prueba de coagulasa , en dos tubos con un ml de plasma cada uno,depositar en uno 0,5 ml del cultivo de Staphylococcus aureus y en otro un ml de Streptococcus epidermidis. Incubar 30 minutos a 37º C.▪ Preparar un frotis con las colonias que han desarrollado en el agar Sangre y enagar Manitol salado

Preparación de FrotisMETODOLOGÍA
La identificación de Staphylococcus y Streptococcus, se basa en la morfología delas colonias que se observan en los cultivos primarios y en el tipo de hemólisis en agar Sangre. Sin embargo para evitar errores de interpretación , se emplean pruebas bioquímicas como :

Prueba de Catalasa
La catalasa es una enzima que cataliza la descomposición de peróxido dehidrógeno en agua y oxígeno. Seencuentra presente en la mayoría de los microorganismos aerobios y anaerobios facultativos excluyendo los estreptococos.La prueba se considera positiva cuando se produce una efervescencia rápida con desprendimiento de burbujas : la enzima catalasa convierte el peróxido de hidrógeno , en agua y oxígeno molecular. Esta prueba se emplea para diferenciarlos géneros Micrococcus y Staphylococcus :catalasa positivo del género Streptococcus: catalasa negativo




Fermentación del manitol
El agar Manitol salado es un medio altamente selectivo para el aislamiento de Staphylococcus
patógenos en cultivos mixtos, ya que se aprovecha la capacidad de los Staphylococcus
de desarrollar en presencia de Cloruro de sodio (Na Cl) al 7,5 %y la de fermentar manitol, en este caso se observará laformación de un halo amarillo en el agar circundante a las colonias.
Peróxido dehidrógeno

Coagulación del plasma
Staphylococcus aureus produce una proteína llamada coagulasa , capaz de aglutinar el plasma tratado con oxalato, citrato o heparina en presencia de un factor contenido en el suero. Este factor sérico reacciona con la coagulasa , activando el fibrinógeno y produciendo un coágulo o trombo defibrina. La coagulasa se presenta en forma unida (adherida a la célula) y en forma libre. El estudio de la actividad coagulasa se puede llevar a cabo en un tubo de ensayo (para coagulasa libre) y en portaobjetos(coagulasa nido), también llamado factor de agregación , la prueba en tubo se hace poniendo un ml de plasma al que se le agrega una asada de un cultivo nocturno de S. aureus . Se incuba...