Analisis de acidos grasos por cromatografia

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ANÁLISIS DE ÁCIDOS GRASOS POR CROMATOGRAFÍA DE GASES


Facultad De Ciencias Pecuarias; Programa de Medicina Veterinaria; Semestre III; Nutrición; Universidad de Nariño; San Juan de Pasto, Nariño – Colombia

1. Identificar los ácidos grasos que se encuentran en la muestra problema, el orden de elución y la proporción de la muestra

Los ácidos grasos que encontramos en la muestra problemade aceite de semilla de tuna en comparación con la muestra estándar es:

Orden de elución | Tiempo en muestra problema | Diferencia con muestra estándar | Proporción (%) | Acido Graso |
1 | 3,141 | 0,275 | 30,205 | Isopentanoico |
3 | 4,850 | 0,042 | 0,342 | Pentanoico |
9 | 10,774 | 0,116 | 2,112 | Laurico |
13 | 13,182 | 0,008 | 4,216 | Palmítico |
14 | 13,541 | 0,205 | 6,610 |Palmitoleico |
16 | 15,032 | 0,217 | 4,851 | Oleico |
17 | 15,624 | 0,142 | 8,482 | Linoleico |

En la identificación tuvimos en cuenta que la máxima diferencia entre la muestra problema y la muestra estándar es como máximo 0,8 y en cuanto a la proporción total de los ácidos grasos identificados es de 56,818% y el 43,182 corresponde a los ácidos grasos no identificados.

2. ¿Por qué serealiza el proceso de derivatización de los ácidos grasos?
El proceso de derivatización se realiza debido a la baja volatilidad de los ácidos grasos, para poder analizarlos por cromatografía gaseosa se convierten previamente mediante el siguiente proceso

Reactivo 1: 45 g NaOH
150 ml metanol
150 ml agua destilada

Reactivo 2:325 ml 6N HCl
275 ml alcohol metílico

Reactivo 3: 200 ml hexano
200 ml metil ter-butil éter

Reactivo 4: 10.8 g NaOH
900 ml agua destilada

3. Describa las principales características de una columna capilar para cromatografía de gases.
La columna constituye la parte esencial delsistema cromatográfico y de la que depende el éxito o el fracaso de los análisis. En ella está contenida la fase estacionaria, que determina la selectividad y la eficacia de las separaciones.
Las columnas tubulares abiertas o columnas capilares son mucho más estrechas y suelen ser mucho más largas que las columnas empaquetadas (anteriormente utilizadas en cromatografía de gases). La teoría de lascolumnas sin relleno fue inicialmente expuesta por Golay en 1957.
Las principales características son:
* Las columnas capilares proporcionan mayor resolución debido a que la longitud de la columna es mayor, con lo que se aumenta el número de platos teóricos, pudiéndose llegar a los 500000
* El tiempo necesario para realizar un análisis (tiempos de retención) con columnas WCOT es menor que concolumnas empaquetadas, como consecuencia del menor contenido de fase estacionaria, con lo que los solutos se retienen menos tiempo.
* La cantidad de muestra utilizada con columnas capilares suele ser del orden de los nano-gramos
* Aunque en las columnas capilares se utiliza una cantidad de muestra considerablemente menor que en las columnas empaquetadas, el límite de detección es del mismo ordende magnitud, debido a que con aquellas tiene lugar un menor ensanchamiento de las bandas, originándose picos estrechos bien definidos.

4. Realice una explicación de los principales componentes de un equipo de cromatografía de gases.
Un cromatógrafo de gases consta básicamente de los siguientes componentes:
* Fuente de gas portador con los correspondientes reguladores y medidores depresión.
* Sistema para la introducción de las muestras.
* Columna cromatográfica
* Detector.
* Sistema para el tratamiento de datos y registrador

Gases portadores (fase movil)
El gas portador, que actúa como fase móvil y transporta los componentes de la muestra a través de la columna y hasta el detector, deberá ser una especie químicamente inerte respecto al analito y...
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