biologia

Resumen
Principios de clonación molecular
Métodos de análisis de ácidos nucleicos
Mapas de restricción
Reacción en cadena de la polimerasa
Secuenciación nucleotídica del ADN
Proyecto del Genoma Humano
Campos de aplicación de la tecnología del ADN recombinante
Conclusiones
Referencias bibliográficas
RESUMEN
Se ofrecen elementos conceptuales sobre algunos de los métodos de biologíamolecular de más amplio uso en biomedicina. Las principales aplicaciones de estas técnicas son en el diagnóstico de enfermedades hereditarias, infecciosas y neoplásicas así como en estudios de regulación de la expresión génica y en la terapia con proteínas recombinantes. El Proyecto del Genoma Humano tomó como base para su ejecución muchas de estas técnicas, al tiempo que ha permitido el desarrollo denuevas metodologías y el perfeccionamiento de las ya existentes. Con la aplicación de las técnicas de biología molecular en medicina, se ha abierto también la posibilidad de llevar a cabo la terapia génica en humanos.
Palabras clave: ácido desoxirribonucleico (ADN), enzimas de restricción, reacción en cadena de la polimerasa, hibridación, secuenciación del ADN, genoma, terapia génicaINTRODUCCIÓN
La estructura que conocemos hoy como ADN (ácido desoxirribonucleico) fue descrita por Watson y Crick en el año 1953. Tras este hecho confluyeron ideas y nuevos enfoques experimentales que condujeron a lo que ha sido denominado como dogma central de la genética molecular, que establece que la información genética fluye del ADN al ARN (ácido ribonucleico) y de este a la proteína, y por tanto esel ADN el material que almacena la información genética en unidades de información hereditaria denominadas genes. Aún cuando este enunciado es cierto para la mayoría de los seres vivientes; se ha comprobado que en determinados virus la información genética se almacena en forma de ARN y esta puede ser transferida del ARN al ADN a través de un proceso de transcripción inversa (Moreno, 1996).
Aligual que en las proteínas, el ADN y el ARN están compuestos por repeticiones de pequeños bloques, pero con la diferencia de que en lugar de aminoácidos, se trata de moléculas más complejas conocidas como nucleótidos. Los nucleótidos, en el ARN, están dispuestos en una sola cadena resultante de la copia del ADN en forma complementaria; en cambio, en el ADN, los nucleótidos se sitúan formando doscadenas orientadas en direcciones opuestas y enrolladas alrededor de un eje imaginario formando una doble hélice (Moreno, 1996).
El genoma es la información genética con que cuentan los seres vivos, la cual está almacenada en los genes y estos a su vez en los cromosomas. Los cromosomas están compuestos por ADN y un grupo de proteínas llamadas histonas. El genoma humano contiene cerca de 3 billones denucleótidos (pares de bases, pb) (National Human Genome Research Institute, 2004) presentes en 46 cromosomas (22 autosomas y 2 cromosomas sexuales).
En las últimas décadas la tecnología de recombinación del ADN también conocida como ingeniería genética, o más acertadamente recombinación genética in vitro, ha revolucionado la Biología. El campo de la salud es, uno de los más beneficiados con eldesarrollo de esta tecnología. Las investigaciones que se realizan en esta área están enfocadas a un diagnóstico oportuno de enfermedades, así como su posible tratamiento a través de la terapia con moléculas recombinantes e introducción de genes. Además, la manipulación de genes proporciona una herramienta fundamental para la eliminación futura de enfermedades mortales para el hombre (Cerezo &Madrid, 1995). Por estas razones resulta útil que el médico de asistencia esté familiarizado con conceptos básicos sobre biología molecular, su aplicación en la investigación biomédica, y en especial con sus posibles aplicaciones clínicas, conceptos estos que aparecen cada vez con mayor frecuencia en toda la literatura biomédica, tanto básica como clínica.
Principios de clonación molecular

La...