BIOQUIMICA 2 1

EFECTOS DEL PH SOBRE LA GLUCOSA OXIDASA

Objetivos:
Demostrar el efecto del PH sobre la glucosa oxidasa.

Fundamento:

Para cada enzima existe un óptimo de pH en elque se crean las condiciones más favorables para el mantenimiento de la conformación funcionalmente activa de la molécula.

Los grupos amino y carboxilo de los restos de aminoácidosionizados a una magnitud de pH determinada, participan en el mantenimiento dela conformación de la molécula proteínica necesaria para la confrontación de los censos catalíticos dela enzima y favorecen también a su ligación con el sustrato. 

A magnitud del pH distinta sealtera la ionización de los grupos correspondientes, y como resultados se rompen losenlaces que aseguran la formación de los centros catalíticos, y la enzima se inactiva. A los valores del pH muy altoso muy bajos las enzimas se desnaturalizan.

Materiales y reactivos:-Agua destilada.
- HCl 0.01 M.
- Glucosa.
- NaOH 0.01M
- Pipetas.
- Espectrofotómetro.





Procedimiento:


I
II
III
Reactivo del trabajo (ml)
1 ml
1ml
1 ml
HCl 0.01 M
0.01
-
-
NaOH0.01 M
-
0.01
-
Glucosa (ul)
10
10
10
Incubar x 10 minutos
37 ºC
37 ºC
37 ºC
Absorbancia
0.100/0.05
0.121/0.179
0.293/0.105
{Glucosa}
22.900/13.282
27.709/40.991
67.047/24.045Longitud de Onda 505 nm.

Cálculos:
Concentración de Glucosa: F x Absb. Del tubo problema
F= {Glucosa}
Absb. Del estándar

Resultados:
Grupo 1:
F= 22.900F= 229
0.100
Grupo 7:
F= 13.282 F= 229
0.058
Grupo 3:
F= 27.709 F= 229
0.121
Grupo 9:
F= 40.991F= 229
0.179


Grupo 5:
F= 67.097 F= 229
0.293
Grupo 11:
F= 24.045 F= 229
0.105




















Anexos