Bioquimica

1) ¿Qué efectos tienen y como afectan la actividad enzimática el realizar la reacción a 0°C, temperatura ambiente, 37°C y 90°C?
Las enzimas para poder llevar a cabo su acción necesitan una temperatura óptima, la cual es a los 37° C, es decir es en este punto donde la enzima está actuando más eficazmente. En cambio a los 0° C no hay actividad enzimática ya que las moléculas reactantes no poseensuficiente energía cinética para llevar a cabo la reacción de la enzima. Al aumentar la temperatura hasta los 90° C la enzima se ha desnaturalizado, por lo que la actividad enzimática va decrecer rápidamente hasta anularse.

2) ¿Qué efectos tienen y como afectan la actividad enzimática el tratamiento de la saliva con NaCl?
En presencia de NaCl la actividad enzimática de la amilasa aumentapuesto que necesita un tiempo menor al del central para lograr el efecto acromático. Se podría suponer que Na+ o Cl- pueden afectar la acción enzimática de la alfa amilasa

3) ¿A qué pH y a que temperatura esperaría Ud. que la α-amilasa tuviera su actividad óptima? ¿Por qué?
pH: 7.0
Porque cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función (pH óptimo) y cualquier variacióndel mismo puede afectar la velocidad de la reacción química catalizada
T°: 25°C
Dado que las enzimas son estructuras proteicas pueden ser desnaturalizadas a medida que aumenta la t° y perder así su actividad biológica. La temperatura en la cual se desarrolla la máxima actividad enzimática se denomina como optima.

4) ¿Qué experimento demostraría que la actividad de la α-amilasa se debe a lapresencia de una proteína?
Para medir la actividad enzimática de la a-amilasa, se utilizará un test colorimétrico que detecta el almidón. Para ello se contará con una solución de iodo/ioduro de potasio (I2/IK), ya que el almidón en presencia de esta solución adquiere una coloración azulada característica. Esto tiene una explicación física: el iodo se coloca en el interior de la hélice que formala amilasa (en las regiones hidrofóbicas), formando un complejo de color azul. Cuando la a-amilasa actúa, degrada la amilasa, se desintegra la hélice y por tanto en presencia de I2/IK ya no dará una coloración azul.
Por lo tanto, en este TP mediremos la desaparición de sustrato (evidenciada por el test colorimétrico) para determinar la actividad de la enzima. Además, analizaremos cómo afectan lasdistintas condiciones en que actúa la enzima (pH, temperatura, concentración de NaCl), así como los efectos que pueden causar diferentes pre tratamientos (proteinasa, calor).
La dilución óptima nos indicará cuánto debemos diluir la saliva para que se logre el efecto acromático dentro del rango propuesto (2-8 minutos).

5) Explique las modificaciones a nivel molecular que experimentan lasenzimas al variar el pH.
Efecto del pH
La dependencia del pH usualmente refleja el ambiente en el cual la enzima es activa.
Arriba del pH óptimo, se rompen los enlaces iónicos. También se ven afectados los residuos cargados en el sitio activo
 Las enzimas son proteínas que tienen la capacidad de facilitar y acelerar las reacciones químicas que tienen lugar en los tejidos vivos, debido a estacaracterística proteica, muchas enzimas por el pH de donde se encuentran pueden cambiar desde un estado ionizado a uno no ionizado, afectando así la actividad biológica de las mismas. Cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función (pH óptimo) y cualquier variación del mismo puede afectar la velocidad de la reacción química catalizada.

6) ¿Qué otros factores, además de losevaluados en la práctica, que pueden afectar la actividad enzimática? y ¿Describa brevemente como se afectaría dicha actividad?
A. Concentración de sustrato
En general a medida que aumenta la cantidad de reactivos o sustratos la velocidad también aumenta. En el caso de las reacciones químicas conviene aclarar que la velocidad se mide como cantidad de producto formado por unidad de tiempo, las...