bioquimica
INFORME DE LA ACTIVIDAD PRACTICA
OBJETIVOS:
Evaluar el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad inicial de una
reación catalizada.
Determinar los parámetros cinéticos (Km y Vmax) de la invertasa de levadura.
CURVA DE CALIBRACION DEL DNS CON GLUCOSA:
TABLA DE DATOS Y GRAFICOS:
CUADRO Nº1 Y GRAFICA
TUBOS
[Glu] mM
1
23
4
5
20
40
60
80
100
Abs 570 nm
0,056
0,036
0,114
0,207
0,254
CURVA DE CALIBRACION
0,3
f(x) = 0x - 0,04
R² = 0,9
0,25
cm-1. μM -1
Abs 570 nm
0,2
Abs 570 nmRegresión lineal para
Abs 570 nm
0,15
0,1
0,05
0
10
20
30
40
50
60
[Glu]mM
70
80
90
100
110
CUADRO Nº 2 Y GRAFICA:
TUBOS
[Sacarosa]mM
0
1
2
3
4
5
7V0 mM/Min
0
10
20
50
100
300
400
Abs U:A
0
0
0,0015 0,041
0,00028 0,076
0,0064
0,172
0,008 0,217
0,011 0,296
0,0007
0,02
V0 mM/Min=f([S]mM)
0,01
0,01
V0 min
0,010,01
Columna C
Regresión logarítmica
para Columna C
0
0
0
0
50
100
150
200
250
[Sacarosa] mM
300
350
400
450
CUADRO Nº3 Y GRAFICA
TUBOS
0
1
23
4
5
7
1/[Sacarosa]mM 1/V0 min
0
0
0,1
66,6
0,05
3571,4
0,02
156,3
0,01
12,5
0,03
90,9
0,001
1428,6
1/V0 min=f(1/[S]mM)
180
f(x) = 349,75x + 54,07
R² = 0,05
cm-1. μM -1160
140
1/[S]mM
120
100
80
60
40
Columna C
Regresión lineal para
Columna C
20
0
0
0,02
0,04
0,06
1/V0 min
0,08
0,1
0,12
CALCULOS:
En la gráfica Nº1, curva decalibración. (no se usa el tubo b, porque es el tubo blanco, se
empieza del tubo 1) obtenemos el coeficiente de extinción molar hallando la pendiente de
la recta. Se seleccionaron datos y serealiza la linea de tendencia o regresión lineal que
muestre el coeficiente o trazado al cuadrado (R2 cm-1. μM -1). La recta promedio jamás
va a pasar por todos los puntos. El R2 varía entre 0 y 1,...
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