Bioquimica

Laboratorio de Bioquímica. Grupo H2

INFORME PRÁCTICA 5:
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA Y COLESTEROL EN SANGRE
Silvia Juliana Becerra Anaya. Código: 2080117
Andrea Katherine González. Código: 2080139
Universidad Industrial de Santander
Facultad de Ciencias Básicas
Escuela de Química
Recibido: Luis Oveimar Barbosa Jaimes. Aceptado: Octubre 3, 2012
RESUMEN
En la práctica se llevó a cabo ladeterminación de glucosa y colesterol en una muestra de sangre. Para
cual, se utilizaron los reactivos de Biosystems para uso in vitro en el laboratorio clínico. Los compuestos
de interés se cuantificaron por espectrofotometría a 505 nm.

INTRODUCCIÓN:
La glucosa es la principal fuente de energía para el
metabolismo celular, esta se almacena en el hígado
el cual tiene un papel importante en elmantenimiento de la glucosa en sangre, su
determinación es útil para el diagnóstico de
numerosas
enfermedades
metabólicas
principalmente la diabetes mellitus.
Al igual que la glucosa, es necesario la
determinación del colesterol en sangre para la
prevención cardiovascular ya que se ha visto que
este contribuye a la formación de ateromas, lo cual
es debido a que es una sustancia cerosaque se
puede encontrar en todo nuestro cuerpo (tejidos
corporales y plasma sanguíneo). [1]
En la presente práctica se determina la
concentración de glucosa y colesterol en sangre
mediante complejos coloreados que se cuantifican
por espectrofotometría a una longitud de onda de
específica.
OBJETIVOS GENERALES:
 Determinación de glucosa y colesterol en
sangre mediante la formación decomplejos coloreados para su posterior
cuantificación por espectrofotometría a
una longitud de onda especifica.

 Analizar los resultados obtenidos de las
concentraciones de glucosa y colesterol,
por comparación con los niveles promedio
de estos.
MARCO TEÓRICO
La glucosa es un azúcar que es utilizada como
fuente de energía para el organismo, esta se
incrementa en la sangre al ingeriralimentos
diferentes al agua, lo que se consume desaparece
de la sangre mediante el empleo de una hormona
reguladora producida por el páncreas conocida
como insulina, cuando ocurre lo contrario se
secreta otra hormona llamada glucagón que
permite mantener los niveles de glucosa en sangre.
El análisis de la glucosa permite medir la
concentración de esta presente en la sangre para la
prevencióno diagnóstico de una diabetes mellitus
o sacarina, esta enfermedad se caracteriza por
presentar valores superiores a 140 mg/dL, entre 70
y 110 mg/dL se consideran valores normales, pero
inferiores a 60 mg/dL desencadena una
hipoglicemia.
Su determinación se realiza después de la
oxidación enzimática en presencia de glucosa
oxidasa. El peróxido de hidrogeno formado
reacciona bajo lacatálisis de peroxidasa con fenol
1

Determinación de glucosa y colesterol en sangre

y 4-aminofenazona formando un complejo rojovioleta usando la quinoneimina como indicador, el
cual
es
posible
cuantificarlo
por
espectrofotometría, a continuación se muestran las
reacciones sucedidas:

1. Determinación de Glucosa
Las soluciones mostradas en la Tabla 1 se
colocaron en tubos de ensayo,estos se incubaron
a 37 °C durante 5 minutos. Finalmente, se leyó su
absorbancia a =505 nm.

()

()

La reacción 1 se realiza en presencia de glucosa
oxidasa y la 2 en peroxidasa.
El colesterol es una sustancia que se encuentra en
todos los tejidos normalmente en la sangre, el
organismo necesita colesterol para la síntesis de
hormonas y sales biliares que desempeñan una
fuenteimportante en la absorción de las grasas
procedentes de los alimentos, si la cantidad de este
es grande puede contribuye a la formación de
ateromas.
Este es posible medirlo mediante un examen de
triglicéridos en sangre, el cual se determina
después de la hidrólisis enzimática y la oxidación.
El indicador es la quinoneimina formada por el
peróxido de hidrogeno y 4-aminoantipirina en
presencia...