bioquimica


generalidades:

Las soluciones coloreadas exhiben color porque al pasar a través de ellas son absorbidas radiaciones de longitud de onda diferente y complementaria de las que atraviesan lasolución, además la luz blanca que entra en una solución coloreada emerge de la misma con intensidad disminuida y mientras más oscura sea el color o ms intenso, mayor debe ser el grado de absorción a ciertalongitud de onda.
Los procedimientos analíticos que se basan en la media directa de la intensidad del color en términos de absorbancia en longitudes de ondas específicas se conoce como fotométricos y elinstrumento que se usa es el fotómetro.
Los procedimientos colorímetros están limitados a la porción visible del espectro, mientras que los principios generales de la porción ultravioleta einfrarroja del espectro.



OBJETIVOS:


1. Determinar la curva espectral de un colorante.
2. Demostrar la ley de Lambert y Beer.
3. Determinar fotométricamente la concentración de una sustanciaproblema.


MATERIALES:

1. Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
2. Tubos de ensayo.
3. Pipetas.
4. Vasos de precipitación.
5. Permanganato de potasio.
6. Gradilla.Procedimiento:

DETERMINACION DE LA CURVA ESPECTRAL:
Se denomina así a los distintos valores de absorbancia que presenta una sustancia o colorante frente a diversas longitudes de onda.
Prepararuna solución de permanganato de potasio 0.04% (solución stock). Almacenar en frasco oscuro o protegerla de la luz.
Diluir 1ml. De dicha solución en 9 ml. De agua.
Preparar el sistema de lectura enel espectrofotómetro.
Leer absorbancia usando el rango de la luz visible (400-700nm); previamente se debe cerrar el equipo con un blanco de reactivos que para este caso será el agua destilada.
CURVAESTANDAR:
Consiste en utilizar varias diluciones de concentración conocida y progresiva (estándares), los cuales tendrán distintos valores de absorbancia, para luego construir un gráfico en un...