TECNICAS DE MANIPULACIÓN DEL ADN

La ingeniería genética consiste en la alteración artificial del genoma de un ser vivo modificando su ADN. Para ello es preciso aplicar una serie de métodos ytécnicas reciben el nombre de tecnología del ADN recombinante.
Estas técnicas son:
-SECUENCIACIÓN DEL ADN:

Cuando se conoce la secuencia de bases de ungen se pueden identificar las regiones codificadoras de proteínas , y las regiones que corresponden a secuencias reguladoras de la expresión del gen. Conociendo la secuencia codificadora del gen sepuede deducir la secuencia de aminoácidos de la proteína codificadora.

-FORMACIÓN DE MOLÉCULAS DE ADN RECOMBINANTE:
La formación de moléculas de ADN recombinante se realiza entres etapas:

1) CORTE DE FRAGMENTOS DE ADN: Las endonucleasas de restricción son unas enzimas bacterianas que presentan la propiedad de cortar el ADN solo en determinadassecuencias de nucleótidos. Estas enzimas cortan las dos cadenas de ADN en unos lugares específicos dentro de la secuencia diana.
2) SEPARACIÓN DE LOS FRAGMENTOS DE ADN: Cuando se ha cortado unamolécula de ADN se originan fragmentos de diferentes tamaños los cuales se separan mediante la electroforesis en gel debido a que al aplicar un campo eléctrico a los distintos fragmentos de ADN estos dedesplazan por el gel en función de su tamaño. Los mas pequeños migran más en el gel que los mas grandes originando diferentes bandas dependiendo de su tamaño.
3) UNIÓN AL VECTOR: Tras separar losfragmentos de ADN, hay que unirlos a otras moléculas de ADN transportadoras denominada vectores. La unión se hace mediante la enzima ADN ligasa, que forma una unión covalente entre ambos fragmentos.

Lasmoléculas de ADN que resultan de la unión de un gen elegido y un vector adecuado para su transporte recibe el nombre de ADN recombinante.

-SÍNTESIS DE ADN COMPLEMENTARIO:... [continua]

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