BUFFER PBS

Protocolos y métodos
Laboratorio de Genómica Viral y Humana
Facultad de Medicina UASLP

Preparación de Phosphate Buffered Saline (PBS)
Creado: 02 de Abril del 2008
Ultima modificación: 22 de Mayo del2008

Preparación de Phosphate Buffered Saline (PBS)
La Solución Salina Amortiguada por Fosfatos (PBS) constituye una solución amortiguadora de pH comúnmente empleada para
procedimientos bioquímicos.Su osmolaridad y concentración de iones (Cl-, Na+ y K+) es muy semejante a la del líquido
extracelular de los mamíferos. Esta solución se prepara a partir de Cloruro de Sodio, Fosfato de Sodio y, enalgunas
formulaciones, con Fosfato de Potasio. Esta solución es isotónica y no-tóxica para las células de los mamíferos. El PBS se
emplea como vehículo neutro para células, ya que no modifica elperfil de expresión y funcionamiento celular normal. Esta
solución es empleada comúnmente para lavar células a través de centrifugación. El PBS puede ser empleado como diluyente
para métodos de desecaciónde biomoléculas, ya que las moléculas de agua presentes en el PBS se adhieren alrededor de la
biomolécula permitiendo inmovilizarla a una superficie sólida. Esta monocapa de agua evita que labiomolécula sea
desnaturalizada (o sufra modificaciones conformacionales) en el proceso de desecación. Los amortiguadores a base de
carbonatos también son empleados para este procedimiento, aunque con menoréxito. El PBS también es empleado como
referencia espectral para procedimientos de elipsometría por absorción proteica El PBS puede ser complementado con aditivos
para procedimientos específicos. Laadición de EDTA, por ejemplo, permite disgregar células cuando estas forman agregados.
La incorporación de Zinc, no obstante, no es recomendada ya que provoca la precipitación de otras salesconstituyentes.

Procedimiento:
1.

Prepare 100 mL de Acido Clorhídrico 1M (1M HCl) agregando 8.62 mL de HCl concentrado a 91 mL de dH20
previamente colocados en un vaso de precipitados de 250 mL. ¡No agregar...